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人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒

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人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒
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蔣菲菲:
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詳細(xì)介紹

人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒

 

Elisa的操作步驟及要點(diǎn)
(一)操作步驟
1. 包被抗原:用包被液將抗原作適當(dāng)稀釋, 一般為110μg /孔,每孔加200μl37溫育1小時(shí)后,4冰箱放置1618小時(shí)。
2.
洗滌:倒盡板孔中液體,加滿洗滌液,靜放三分鐘,反復(fù)三次,zui后將反應(yīng)板倒置在吸水紙上,使孔中洗滌液流盡。
3.
加封閉液200μl37放置一小時(shí)。
4.
洗滌同2。
5.
加被檢血清:用稀釋液將被檢血清作幾種稀釋,,每孔200μl。同時(shí)作稀釋液對(duì)照。37放置2小時(shí)。
6.
洗滌同2
7.
加辣根過(guò)氧化物酶羊抗兔IgG, 每孔200μl, 放置37 1小時(shí)。
8.
洗滌同2。
9.
加底物:鄰苯二胺溶液加200ml,室溫暗處10--15分鐘。
10.
加終止液:每孔50μl
11.
觀察結(jié)果:用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀記錄490nm讀數(shù)。
(二)操作要點(diǎn)
優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證 ELISA 檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式 ELISA 各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球 ELSIA,國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。

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