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人心肌細胞膜B1-AR(B1-AR)ELISA試劑盒

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更新時間:2016-10-21 13:50:42瀏覽次數(shù):492次

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人心肌細胞膜B1-AR(B1-AR)ELISA試劑盒
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人心肌細胞膜B1-AR(B1-AR)ELISA試劑盒

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、*化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1.         酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。

2.         標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。

3.         樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4.         *標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6.         *標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8.         底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9.         濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10.     終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 

需要而未提供的試劑和器材

1.         標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2.         高速離心機

3.         電熱恒溫培養(yǎng)箱

4.         干凈的試管和Eppendof管

5.         系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器

6.    蒸餾水,容量瓶等

標(biāo)本的采集及保存

1.         血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2.         血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.         細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進行此項檢測。

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