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卡邁舒(上海)生物科技有限公司

人螺旋肽(THP)ELISA試劑盒

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更新時間:2016-10-23 22:01:56瀏覽次數:354次

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人螺旋肽(THP)ELISA試劑盒
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人螺旋肽(THP)ELISA試劑盒

實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

試劑盒組成及試劑配制

1.         酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。

2.         標準品(Standard):2瓶(凍干品)。

3.         樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4.         *標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5.         辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6.         *標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7.         辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8.         底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9.         濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10.     終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

 

需要而未提供的試劑和器材

1.         標準規格酶標儀

2.         高速離心機

3.         電熱恒溫培養箱

4.         干凈的試管和Eppendof管

5.         系列可調節移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器

6.    蒸餾水,容量瓶等

標本的采集及保存

1.         血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

2.         血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

3.         細胞培養物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

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