中文名稱:人可溶性CD25(sCD25)ELISA試劑盒
檢測原理:ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術.
種屬包括:人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等等
規格:48T/96T(可提供定性定量)
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人可溶性CD25(sCD25)ELISA試劑盒操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標
準品 100µl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50µl,混勻;然后從*孔、第二
孔中各取 100µl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50µl,
混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl棄掉,再各取 50µl分別加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各
取 50µl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50µl,混
勻后從第七、第八孔中分別取 50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液 50µl,混勻后從第九第十孔中各取 50µl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50µl,
濃度分別為 150 pg/mL,100 pg/mL ,50 pg/mL,25pg/mL,12.5 pg/mL)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣
品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混
勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30(48T的 20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的 20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
注意事項:
新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以避免反復凍融。
安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4 Elisa試劑盒請遠離兒童
自備物品:
1 、 37 ℃ 恒溫箱2 、 標準規格酶標儀3 、 精密移液器及一次性吸頭4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管6 、 吸水紙
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚*千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,
可概括四個方面:
1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2、研究抗酶抗體的合成。
3、顯現微量的免疫沉淀反應。
4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。
Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。指標齊全elisa試劑盒供給科研單位實驗研究,高校發布文獻,可提供免費代檢測,一周出數據,公司具有國內外的技術水平,更好的售后服務和優質的解決方案,為您提供高品質高服務高創新的產品。
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