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卡邁舒(上海)生物科技有限公司

兔干擾素-γ(IFN-γ)ELISA試劑盒

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所在地上海市

更新時(shí)間:2016-06-15 14:37:53瀏覽次數(shù):516次

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兔干擾素-γ(IFN-γ)ELISA試劑盒
上海卡邁舒生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)營(yíng)高品質(zhì)ELISA試劑盒,生化試劑,標(biāo)準(zhǔn)品,培養(yǎng)基。種屬齊全,指標(biāo)上千萬種。質(zhì)量好發(fā)貨及時(shí),靈敏度高,詢價(jià)或在線咨詢索取產(chǎn)品說明書。
蔣菲菲:

兔干擾素-γ(IFN-γ)ELISA試劑盒

 

 

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操作步驟

1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)

準(zhǔn)品 100µl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50µl,混勻;然后從*孔、第二

孔中各取 100µl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl

混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl棄掉,再各取 50µl分別加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各

50µl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,混

勻后從第七、第八孔中分別取 50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)

品稀釋液 50µl,混勻后從第九第十孔中各取 50µl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50µl

濃度分別為 150 pg/mL100 pg/mL 50 pg/mL25pg/mL12.5 pg/mL)。

2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣

品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl(樣

品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混

勻。

3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。

4.  配液:將 3048T 20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T 20倍)倍稀釋后備用。 

5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復(fù) 5次,拍干。

6.  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。

7.  溫育:操作同 3

8.  洗滌:操作同 5

9.  顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.  

10.  終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.  測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止

液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):

新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。

安全性:

1 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。

2 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4 Elisa試劑盒請(qǐng)遠(yuǎn)離兒童

自備物品:

1 37 恒溫箱2 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3 精密移液器及一次性吸頭4 蒸餾水

5 一次性試管6 吸水紙

 

 

 

 

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