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兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2016-05-30 02:28:54瀏覽次數(shù):470次

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兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
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兔載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒

 

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操作步驟

1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)

準(zhǔn)品 100µl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50µl,混勻;然后從*孔、第二

孔中各取 100µl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,

混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl棄掉,再各取 50µl分別加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各

50µl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,混

勻后從第七、第八孔中分別取 50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)

品稀釋液 50µl,混勻后從第九第十孔中各取 50µl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50µl,

濃度分別為 150 pg/mL,100 pg/mL 50 pg/mL,25pg/mL12.5 pg/mL)。

2.  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣

品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣

品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混

勻。

3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。

4.  配液:將 3048T 20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T 20倍)倍稀釋后備用。 

5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復(fù) 5次,拍干。

6.  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。

7.  溫育:操作同 3。

8.  洗滌:操作同 5

9.  顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.  

10.  終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.  測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止

液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

注意事項(xiàng):

新鮮標(biāo)本盡早檢測,對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮?,將?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。

安全性:

1 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。

2 實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4 Elisa試劑盒請(qǐng)遠(yuǎn)離兒童

自備物品:

1 、 37 恒溫箱2 、 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀3 、 精密移液器及一次性吸頭4 、 蒸餾水

5 一次性試管6 、 吸水紙

 

 

 

卡邁舒(上海)生物一直秉承以用戶需求為核心,在專注上海本地市場開拓的同時(shí),為全國各地區(qū)科研單位提供實(shí)驗(yàn)高質(zhì)量產(chǎn)品,優(yōu)質(zhì)、用心的服務(wù)贏得了眾多同仁的信賴和好評(píng),逐漸樹立起公司良好品牌。公司不僅僅提供專業(yè)的科研產(chǎn)品,同時(shí)還建立了完善的售后服務(wù)體系,為您實(shí)驗(yàn)進(jìn)行中遇到的問題和困難提供指導(dǎo)幫助。我司堅(jiān)信,通過我們不斷的努力和追求,一定能夠?qū)崿F(xiàn)與各大科研單位互利共贏!

ELISA法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴(kuò)大,

可概括四個(gè)方面:

1、免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位。

2、研究抗酶抗體的合成。

3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。

4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。

Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。指標(biāo)齊全elisa試劑盒供給科研單位實(shí)驗(yàn)研究,高校發(fā)布文獻(xiàn),可提供免費(fèi)代檢測,一周出數(shù)據(jù),公司具有國內(nèi)外的技術(shù)水平,更好的售后服務(wù)和優(yōu)質(zhì)的解決方案,為您提供高品質(zhì)高服務(wù)高創(chuàng)新的產(chǎn)品。

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