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卡邁舒(上海)生物科技有限公司

犬骨橋素(OPN)ELISA試劑盒

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更新時間:2016-05-24 11:32:09瀏覽次數:411次

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犬骨橋素(OPN)ELISA試劑盒
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犬骨橋素(OPN)ELISA試劑盒

 

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操作步驟

1.  標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標

準品 100µl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50µl,混勻;然后從*孔、第二

孔中各取 100µl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液 50µl

混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl棄掉,再各取 50µl分別加到第五、第六孔

中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各

50µl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50µl,混

勻后從第七、第八孔中分別取 50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準

品稀釋液 50µl,混勻后從第九第十孔中各取 50µl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50µl

濃度分別為 150 pg/mL100 pg/mL 50 pg/mL25pg/mL12.5 pg/mL)。

2.  加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣

品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣

品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混

勻。

3.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。

4.  配液:將 3048T 20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T 20倍)倍稀釋后備用。 

5.  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此

重復 5次,拍干。

6.  加酶:每孔加入酶標試劑50µl,空白孔除外。

7.  溫育:操作同 3

8.  洗滌:操作同 5

9.  顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色

15 分鐘.  

10.  終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11.  測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應在加終止

液后 15 分鐘以內進行。

注意事項:

新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-80℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實驗質量,所以避免反復凍融。

安全性:

1 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。

2 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。

4 Elisa試劑盒請遠離兒童

自備物品:

1 37 恒溫箱2 標準規格酶標儀3 精密移液器及一次性吸頭4 蒸餾水

5 一次性試管6 吸水紙

 

 

 

卡邁舒(上海)生物一直秉承以用戶需求為核心,在專注上海本地市場開拓的同時,為全國各地區科研單位提供實驗高質量產品,優質、用心的服務贏得了眾多同仁的信賴和好評,逐漸樹立起公司良好品牌。公司不僅僅提供專業的科研產品,同時還建立了完善的售后服務體系,為您實驗進行中遇到的問題和困難提供指導幫助。我司堅信,通過我們不斷的努力和追求,一定能夠實現與各大科研單位互利共贏!

ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚*千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫學各領域的應用范圍日益擴大,

可概括四個方面:

1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。

2、研究抗酶抗體的合成。

3、顯現微量的免疫沉淀反應。

4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。

Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。指標齊全elisa試劑盒供給科研單位實驗研究,高校發布文獻,可提供免費代檢測,一周出數據,公司具有國內外的技術水平,更好的售后服務和優質的解決方案,為您提供高品質高服務高創新的產品。

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