小鼠骨成型蛋白4（BMP-4）ELISA試劑盒

優質的試劑，良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。

　　1.標本的采取和保存

　　大部分ELISA檢測均以血清為標本。血清標本可按常規方法采集，應注意避免溶血，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。血清標本宜在新鮮時檢測。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG聚合，使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻并避免產生氣泡。混濁或有沉淀的血清標本應先離心或過濾，澄清后再檢測。反復凍融會使抗體效價跌落，所以測抗體的血清標本如需保存作多次檢測，宜少量分裝冰存。保存血清自采集時就應注意無菌操作，也可加入適當防腐劑。

　　抗凝不*的標本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性，建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

　　2.加樣

　　加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可濺出。

　　3.保溫

　　在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1～2小時，產物的生成可達。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，反應板不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。

　　4.洗滌

　　洗滌在ELISA過程中雖不是一個反應步驟，但卻決定著實驗的成敗。ELSIA就是靠洗滌來達到分離游離的和結合的酶標記物的目的。通過洗滌以清除殘留在板孔中沒能與固相抗原或抗體結合的物質，以及在反應過程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的，而在洗滌時應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。可以說在ELISA操作中，洗滌是zui主要的關鍵技術，應引起操作者的高度重視，操作者應嚴格按要求洗滌，不得馬虎。

　　洗滌液多為含非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的，非離子型洗滌劑既含疏水基團，也含親水基團，其疏水基團與蛋白質的疏水基團借疏水鍵結合，從而削弱蛋白質與固相載體的結合，并借助于親水基團和水分子的結合作用，使蛋白質回復到水溶液狀態，從而脫離固相載體。洗滌液中的非離子型洗滌劑一般是吐溫20，其濃度可在0.05%～0.2%之間，高于0.2%時，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗的靈敏度。

　　洗板時注意各種試劑盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀釋，應按要求稀釋，所用的水電導率在1.5us/cm之下，洗液如果結晶應待其融解后配制。保證洗板浸泡時間為40秒左右，孔內液體被洗板機吸收得越干凈洗滌效果更好，手工洗板防止洗液在孔內形成氣泡。

　　5.顯色和比色

　　TMB經HRP作用后，約40分鐘顯色達，隨即逐漸減弱，至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應終止。這類終止劑尚能使藍色維持較長時間（12～24小時）不褪，是目視判斷的良好終止劑。此外，各類酸性終止液則會使藍色轉變成黃色，此時可用特定的波長（450nm）測讀吸光值。酶標比色儀簡稱酶標儀，通常指于測讀ELISA結果吸光度的光度計。酶標儀的主要性能指標有：測讀速度、讀數的準確性、重復性、精確度和可測范圍、線性等等。優良的酶標儀的讀數一般可精確到0.001，準確性為±1%，重復性達0.5%，酶標儀不應安置在陽光或強光照射下，操作時室溫宜在15～30℃，使用前先預熱儀器15～30分鐘，測讀結果更穩定。

　　測讀A值時，要選用產物的敏感吸收峰，如OPD用492nm波長。有的酶標儀可用雙波長式測讀，即每孔先后測讀兩次，*次在zui適波長（W1），第二次在不敏感波長（W2），兩次測定間不移動ELISA板的位置，zui終測得的A值為兩者之差（W1-W2）。雙波長式測讀可減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。

指標齊全elisa試劑盒供給科研單位實驗研究,高校發布文獻,可提供免費代檢測,一周出數據,公司具有國內外的技術水平,更好的售后服務和優質的解決方案,為您提供高品質高服務高創新的產品。

公司客戶遍布華中華東華西華北華南,各大地區,售前售中售后*貼心服務，*快遞送貨上門,需了解試劑盒詳情,請點擊本頁右上方“交談”向本公司客服索取產品說明書。

憑借著高質量的產品，良好的信譽，優質的服務，產品全國近三十多個省、市、自治區。竭誠與各地區商家雙贏合作，共同發展，共創輝煌！...

公司產品瀏覽：http://www.caigou.com.cn/c202656

相關產品發布：

鮑魚睪酮（T）ELISA試劑盒        Salmon T ELISA Kit
鮑魚雌二醇（E2）ELISA試劑盒     Salmon E2 ELISA Kit
鮭魚補體蛋白3（C3）ELISA試劑盒    Salmon C3 ELISA Kit         
鮭魚補體蛋白4（C4）ELISA試劑盒    Salmon C4 ELISA Kit
鯉魚卵黃蛋白原（VTG）ELISA試劑盒      Salmon VTG ELISA Kit
植物Cry1Ac ELISA試劑盒       Plant Cry1Ac ELISA Kit 
植物超氧化物歧化酶（SOD）ELISA試劑盒       Plant Super Oxidase Dimutase SOD ELISA Kit
植物Cry1C ELISA試劑盒     Plant Cry1C ELISA Kit
植物β-葡萄糖苷酸酶（GUS）ELISA試劑盒       Plant GUS ELISA Kit
植物氨基糖苷類-3-磷酸轉移酶（NPT）ELISA試劑盒        Plant NPT ELISA Kit
植物蘇云金芽孢桿菌蛋白（BT）ELISA試劑盒        Plant Bacillus thuringiensis BT ELISA Kit
植物雪花蓮凝集素（GNA）ELISA試劑盒         Plant GNA ELISA Kit
植物吲哚乙酸（IAA）ELISA試劑盒       Plant Indole-3-acetic acid IAA ELISA Kit