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小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒

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更新時(shí)間:2016-06-30 03:46:10瀏覽次數(shù):243次

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小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒
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蔣菲菲: :

小鼠B因子(BF)ELISA試劑盒

 

 

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37孵育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個(gè)孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制,酶標(biāo)板加上覆膜,37溫育1小時(shí)。

3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37溫育1小時(shí)。

5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3

6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37避光孵育15分鐘左右根據(jù)實(shí)際顯色情況酌情縮短或延長(zhǎng),但不可超過(guò)30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時(shí),即可終止

7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度(OD。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測(cè)程序。

9.實(shí)驗(yàn)完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

洗滌方法:

1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去不可觸及板壁或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格的質(zhì)控體系,優(yōu)質(zhì)的技術(shù)服務(wù)團(tuán)隊(duì),讓您用的更放心!

 

 

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