小鼠上皮中性粒細胞活化肽(ENA-78)ELISA試劑盒
樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應準確稀釋,否則會出現結果不準確,樣品應當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
強力振蕩3分鐘
用Whatman 濾紙過濾
取25µl處理后的樣品,加入25µl*于反應孔中(樣本稀釋倍數為2)
酶免分析步驟
實驗須知
實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復至室溫(25±2℃),時間約2小時。回溫至室溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準確度。
使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
請不要改變分析程序
請使用精確的微量移液器
操作一旦開始,請不要中斷任何程序
ELISA結果的可重復性*程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作
為避免交叉污染,每個標準品和樣品均應使用不同的吸頭加樣
加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內表面
分析步驟
預*行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,*進行雙孔檢測. 取所需數量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(10×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
在B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml標準品溶液
在各標準孔中加入50μl的標準品溶液
在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
在所有孔中加入50µl的抗總*抗體酶結合物
輕輕晃動反應板幾秒鐘。
37℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應板,可以減少雙孔誤差)
甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
反應洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動反應板使之*混勻
37℃溫浴10min
每孔中加入50µl終止液,混勻
在450nm下檢測吸光度,結果在5min內讀取。
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