小鼠組織相容性抗原（HLA-2）ELISA試劑盒
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操作步驟： 1. 編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同） 2. 加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻， 3. 溫育：用封板膜封板后置 4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 7. 溫育：操作同3。 8. 洗滌：操作同5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A 50μl，再加入顯色劑B 50μl，輕輕震蕩混勻， 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。 結果判定： 試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10 臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15 陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為免疫缺陷病（FIV）陰性 陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為免疫缺陷病（FIV）陽性 注意事項 1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。 2．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。 3．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。 4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 5．底物請避光保存。 6．試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm 7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為
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