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小鼠二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA試劑盒

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更新時間:2016-04-21 07:02:28瀏覽次數(shù):332次

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小鼠二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA試劑盒
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蔣菲菲: :

小鼠二肽基肽酶IV(DPP4)ELISA試劑盒

 

 

樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準確,樣品應(yīng)當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
強力振蕩3分鐘
Whatman 濾紙過濾
25µl處理后的樣品,加入25µl*于反應(yīng)孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2
酶免分析步驟

實驗須知
 
實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時間約2小時。回溫至室溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的精確度和準確度。
 
使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
 
請不要改變分析程序
 
請使用精確的微量移液器
 
操作一旦開始,請不要中斷任何程序
 ELISA
結(jié)果的可重復(fù)性*程度的取決于操作程序,請嚴格按照要求操作
 
為避免交叉污染,每個標準品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣
 
加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
 
分析步驟
預(yù)*行編號,標記B0、標準品和樣品的位置,*進行雙孔檢測. 取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
 
樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(10×)稀釋成工作液蒸餾水或去離子水稀釋
 
B0孔中加入50µl0.0 ng/ ml標準品溶液

 
在各標準孔中加入50μl的標準品溶液
 
在各樣品孔中加入50µl樣品溶液
 
在所有孔中加入50µl的抗總*抗體酶結(jié)合物
 
輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。
37
℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)

 
甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液體。
 
反應(yīng)洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50µl顯色液A,再加 50µl顯色液B;輕微晃動反應(yīng)板使之*混勻
 37
℃溫浴10min
 
每孔中加入50µl終止液,混勻

 
450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。

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