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小鼠I型原膠原N端前肽(PINP)ELISA試劑盒

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更新時間:2016-06-09 19:49:04瀏覽次數(shù):373次

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小鼠I型原膠原N端前肽(PINP)ELISA試劑盒
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蔣菲菲:

小鼠I型原膠原N端前肽(PINP)ELISA試劑盒

ELISA法是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚*千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的應(yīng)用范圍日益擴大,可概括四個方面: 
1
、免疫酶染色各種細胞內(nèi)成份的定位。 
2
、研究抗酶抗體的合成。 
3
、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)。 
4
、定量檢測體液中抗原或抗體成份。 
酶聯(lián)免疫吸附試驗法以其靈敏度高可達 ng 甚至pg 水平,特異性好等優(yōu)點,在生命科學(xué)各領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用,它已邁出醫(yī)藥、臨床領(lǐng)域,步入農(nóng)業(yè)、漁業(yè)、畜牧業(yè)和食品加工業(yè)。

操作步驟
1
 使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2
 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液11稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
3
 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的*標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37溫育1小時。
4
 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5
 每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37溫育30分鐘。
6
 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7
 每孔加入底物A、B50ul,輕輕振蕩混勻,37溫育10分鐘。避免光照。
8
 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9
 450nm波長處測定各孔的OD值。

 

 

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