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小鼠心肌細胞膜B1-AR ELISA試劑盒價格

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更新時間:2016-04-27 11:37:27瀏覽次數(shù):339次

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小鼠心肌細胞膜B1-AR ELISA試劑盒
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結(jié)果判斷
1)定性測定
定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出""""的簡單回答,分別用"陽性""陰性"表示。"陽性"表示該標本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應(yīng)的強度,其實質(zhì)仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標本作一系列稀釋后進行試驗,呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標本反應(yīng)性的強弱,這比觀察不稀釋標本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。

在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。兩類反應(yīng)的結(jié)果判斷方法不同,分述于下。

i
陽性判定值

陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標準。

用此法判斷結(jié)果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的。現(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設(shè) 2個陽性對照和 3 個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例 0.400),試驗才有效。3 個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:

陽性判定值
=NCX+0.05
標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是,式中 0.05 為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。

根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質(zhì)控作用,試劑變質(zhì)和操作不當均會產(chǎn)生"試驗無效"的后果。

ii.
標本/陰性對照比值

在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,這里的P不代表陽性(positive),而是病人 patient 的縮寫,不應(yīng)誤解。為避免混淆, 更宜用S/N表示。 在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應(yīng)該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應(yīng)注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按 0.05 計算,否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

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