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小鼠B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒價格

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更新時間:2016-06-15 14:26:54瀏覽次數(shù):377次

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小鼠B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒
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蔣菲菲:
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上海卡邁舒-ELISA實驗操作注意事項

  1. 正式試驗時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。


  2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括
:

  (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。


  (2) 包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH9.09.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用41824小時。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.11.010μgml進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為110μgml


  (3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定見酶標(biāo)記抗體部份。然后再固定其它條件或采取方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。


  (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體OPD有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

卡邁舒(上海)生物科技有限公司專業(yè)提供各種屬ELISA試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后完善,有提供免費代檢測。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位。國內(nèi)外專業(yè)ELISA試劑供應(yīng)商,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

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公司:www.kmsbio.com

 

 

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