人膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA試劑盒待檢樣本為細胞培養上清液,血清, 血漿,尿液,組織液,心房水,體液標本等等,如果您準備代檢測,
請寄標本時需注明以下情況:
1、標本編號;
2、所測項目;
3、是否做復孔;
4、;
5、實驗后標本是否寄回。
人膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA試劑盒檢測原理:
采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。
保存:2-8℃
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5.裂解細胞:用*消化后,離心收集細胞,每瓶細胞用100μl細胞裂解液,用吸管吹打數下,使細胞和裂解液充分接觸,冰浴5min,12000 r/min于4℃離心30min,取上清,用于以下實驗。
6. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人膠原酶Ⅲ(Collagenase Ⅲ)ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 待測樣本孔各加待測樣本50μL;
4. 隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 所有孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基(含*) GB
Potato Dextrose Agar with Chloramphenicol
——用于霉菌和酵母菌計數
馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養基(不含*) GB
Potato Dextrose Agar Medium(PDA)
——用于霉菌和酵母菌計數
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) USP/EP
Potato dextrose agar
——用于霉菌和酵母菌計數
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