大腸桿菌宿主殘留蛋白（E.coli P）ELISA試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯板：一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為1,600 pg/ml，將其稀釋為400 pg/ml后，再做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)，分別稀釋成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。如配制200 pg/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1×20ml。
4. 檢測稀釋液A：1×10ml。
5. 檢測稀釋液B：1×10ml。
6. 檢測溶液A：1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔)，實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B：1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 覆膜：5張
12. 使用說明書：1份
大腸桿菌宿主殘留蛋白（E.coli P）ELISA試劑盒操作常見問題：
1．邊緣效應 使用96孔板的ELISA測定中，常發現有“邊緣效應"，即外周孔顯色較中心孔深。經研究證實在溫育中的熱力學梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導體，在實驗室的常規ELISA測定中，將板從室溫(通常在25℃左右)置于37℃溫箱，板也升溫時，在外周孔與中心孔之間可能存在一熱力學梯度。因此使用水浴或在將反應溶液加入至板孔中時，將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃)，就可以很容易地排除“邊緣效應"，并且可提高測定的重復性。
2．加樣,在現在的ELISA商品試劑盒中，必然有使用微量加樣器加入樣本的步驟。注意的關鍵點是：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺出和產生氣泡。加樣太快，無法保證微量加樣的準確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區，易導致非特異吸附。濺出會對鄰近孔產生污染。出現氣泡則反應液界面有差異。所以，有時候一份標本用相同的試劑盒這次測定為陽性，下次測定為陰性，往往就是上述加樣及試劑的錯誤所致。
說明：
1．檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
2．試劑盒保存：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)。
3．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
4．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準。
5．剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質，此為正常現象，不會對實驗結果造成任何影響。
上海勁馬提醒您：
1.試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或小鼠體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2.嚴格按照說明書操作，不同批號不可交換使用，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。為您提供產品咨詢，產品報價,酶聯免疫試劑盒說明書。公司承接生物實驗室實驗外包服務，可提供11實驗代測，專業的服務為您的科研項目節省時間成本，更高效，更準確，更便捷。
