蛋白質羰基測試盒(氧化與抗氧化系列)
測定方法:分光光度法
產品規格:50管/24樣
注 意:正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。
測定意義:
蛋白質羰基是多種氨基酸在蛋白質的氧化修飾過程中的早期標志,其含量高低表明蛋白質氧化損傷程度的大小,是衡量蛋白質氧化損傷的主要指標。
蛋白質羰基測試盒(氧化與抗氧化系列)
測定原理:
羰基與2肼反應生成紅色2腙,在370nm處有特征吸收峰。
自備實驗用品及儀器:
天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機、漩渦震蕩儀、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水,無水乙醇,乙酸乙酯。
試劑組成和配制:
提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑0.1g×5支,4℃避光保存。(使用前根據樣品數,每支加1mL水溶解,每支為10個樣品用量)
試劑二:液體20mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體20mL×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑五:根據測定樣品量,將乙酸乙酯和無水乙醇等體積混合。
試劑六:液體100mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理:
1.組織樣品:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液)進行冰浴勻漿,于4℃,4000g離心10min,取上清,加入0.1mL試劑一,室溫放置10min,4℃,10000g離心10min,取上清待測。
2.細菌、真菌:按照細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL提取液),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后10000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。
3.血清等液體樣本:直接測定。