果糖6磷酸1磷酸轉移酶PFP測試盒光合作用

測定方法：分光光度法

產品規格：50管/48樣

注   意 ：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定。

測定意義：

焦磷酸：果糖-6-磷酸-1-磷酸轉移酶（PFP，EC2.7.1.90）是一種胞質酶，廣泛存在于植物組織中，催化果糖-6-磷酸與果糖-1,6-二磷酸之間的可逆轉化，在光合作用碳代謝中起重要作用。

果糖6磷酸1磷酸轉移酶PFP測試盒光合作用

測定原理：

PFP催化6-磷酸果糖轉化為1,6-二磷酸果糖，它在醛縮酶和磷酸丙糖異構酶的作用下轉變為3-磷酸甘油醛，再由3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH催化生成3-磷酸甘油酸、NAD和磷酸，340nm處的吸光度變化反映了PFP的活性的高低。

自備實驗用品及儀器：

天平、低溫離心機、研缽、紫外分光光度計、1 mL石英比色皿。

試劑組成和配制：  

提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。

試劑一：液體30mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：粉劑×1 瓶，-20℃避光保存。臨用前加5mL蒸餾水充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑三：粉劑×1瓶，-20℃避光保存。臨用前加5 mL蒸餾水充分溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復凍融。

試劑四：液體0.5mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑五：液體0.5mL×1瓶，4℃避光保存。

試劑六：液體5mL×1瓶，4℃避光保存。

酶液提取：

1.組織：按照質量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL提取液）加入提取液，冰浴勻漿后于4℃，10000g離心10min，取上清置冰上待測。

2.細胞：按照細胞數量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后4℃，10000g離心10min，取上清置冰上待測。

3.液體：直接檢測。

測定操作：

1.分光光度計預熱30min，調節波長至340nm，蒸餾水調零。

2.取1mL石英比色皿，依次加入580μL試劑一，100μL試劑二，100μL試劑三，10μL試劑四，10μL試劑五，100μL試劑六，100μL粗酶液，充分混勻，記錄340nm處10s的吸光值A1和310s的吸光值A2，

   △A=A1-A2