牛旋毛蟲(Trichinellaspiralis)elisa試劑盒本試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體樣本中含量。
實驗原理:
牛旋毛蟲(Trichinellaspiralis)elisa試劑盒本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中該產品水平。用純化的本產品抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入本產品抗原,再與HRP標記的本產品抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的本產品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中牛旋毛蟲(Trichinellaspiralis)elisa試劑盒濃度。
試劑盒組成:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 |
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封板膜 | 2片(48) | 2片(96) |
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密封袋 | 1個 | 1個 |
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酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | 2-8℃保存 |
標準品:1800ng/L | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
標本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
- 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200 ng/L,800 ng/L ,400 ng/L,200ng/L, 100 ng/L)。
- 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
- 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
- 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
- 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
- 溫育:操作同3。
- 洗滌:操作同5。
- 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
- 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
- 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
- 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
- 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
- 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,使用排槍加樣。
- 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
- 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
- 底物請避光保存。
- 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
- 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
- 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
牛旋毛蟲(Trichinellaspiralis)elisa試劑盒計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.95以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%
牛旋毛蟲(Trichinellaspiralis)elisa試劑盒保存條件及有效期:
1.試劑盒保存;2-8℃。
2.有效期:6個月
牛旋毛蟲(Trichinellaspiralis)elisa試劑盒其它產品qy-1712R Anti-PCNA(Proliferation Cell Nuclear Antigen) 增殖細胞核抗原抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1713R anti-PDE4D(phosphodiesterase 4D) 磷酸二酯酶4D抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1714R Anti-PDGF-A 血小板源性生長因子-A抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1715R Anti-PDGF-B 血小板源性生長因子-B抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1716R Anti-PDGF-BB((plaet derived growth factor-BB) 血小板源性生長因子-BB抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1717R Anti-PDGF-R-A 血小板源性生長因子受體-A抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1718R Anti-PDGF-R-B 血小板源性生長因子受體-B抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1719R Anti-Pdk4(pyruvate dehydrogenase kinase isozyme 4) 丙酮酸脫氫酶激酶4抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1720R anti-Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1) 胰十二指腸同源異型盒基因抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1721R Anti-PEDF (pigment epithelium-derived factor) 色素上皮源性因子抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1722R Anti-PEG10 (Paternally expressed gene 10) 肝癌高表達基因抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1723R Anti-PEPT1 (Peptide-transporters 1) 腸道肽轉運蛋白1/小肽轉運蛋白1抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1724R Anti-PEPT2 (Peptide-transporters 2) 腸道肽轉運蛋白2/小肽轉運蛋白2抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1725R Anti-P-fscn1 (fascin homolog 1, actin-bundling protein) 磷酸化纖維束蛋白同源物1/肌動蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1726R Anti-P-GP(P-glycoprotein) P-糖蛋白(抗體) 0.1ml/0.2ml
qy-1727R Anti-PGRN (progranulin) 顆粒蛋白前體抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1728R Anti-PI3K/P85 alpha(Phosphatidyl inositol 3-kinase) 磷脂酰肌醇激酶抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1729R Anti-PIBF(progesterone induced blocking factor) 孕激素誘導阻斷因子抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1730R Anti-PIWIL1(piwi-like 1) piwi樣1蛋白抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1731R Anti-PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1732R Anti-PKB/AKT-1(mouse) 蛋白激酶B(小鼠來源抗體) 0.1ml/0.2ml
qy-1733R Anti-PKC(Protein Kinase C) 蛋白激酶C抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1734R Anti-PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 尿激酶型纖溶酶原激活因子抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1735R Anti-PLGF (Placenta growth factor human) 人胎盤生長因子(抗體)相關抗體 RC-0280R(抗大鼠) RC-0234R(抗小鼠) 0.1ml/0.2ml
qy-1736R Anti-PLGF (Placenta growth factor mouse) 小鼠胎盤生長因子抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1737R Anti-PLGF(Placenta growth factor for mouse rat and pig) 胎盤生長因子抗體: 相關抗體:RC-0281R(抗人) RC-0234R(抗小鼠) 0.1ml/0.2ml
qy-1738R Anti-PMP-22(Peripheral Myelin Protein) 外周髓鞘蛋白-22 0.1ml/0.2ml
qy-1739R Anti-Podoplanin Protein 平足蛋白抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1740R Anti-Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “撲克蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白 0.1ml/0.2ml
qy-1741R Anti-Pokemon (POK Erythroid Myeloid Ontogenic factor) “撲克蒙”蛋白又稱“波克曼”蛋白抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1742R Anti-PP-1 蛋白磷酸酯酶-1抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1743R Anti-PP-2A (protein phosphatase 2A) 蛋白質磷酸酶-2A抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1744R Anti-PP-2A(protein phosphatase 2A catalytic subunit) 蛋白質磷酸酶-2A抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1745R Anti-PP2Ac 磷酸酯酶-2Ac抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1746R Anti-PPAR-delta (peroxisome proliferator-activated receptor;PPAR-beta) D型-過氧化酶活化增生受體抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1747R Anti-PPARγ (peroxisome proliferator-activated receptor-gamma) 過氧化酶活化增生受體γ抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1748R Anti-PKB (Akt1/PKB) 蛋白激酶B(兔來源抗體) 0.1ml/0.2ml
qy-1749R anti-P-AKT1/PKB1/2/3(Thr473) 磷酸化蛋白激酶B抗體(磷酸化位點:473) 0.1ml/0.2ml
qy-1750R anti-PKN2 (protein kinase N2) 蛋白激酶N2抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1751R Anti-PR(Progestogerone receptor) 孕激素受體抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1752R Anti-PRL (Prolactin) 鼠抗人泌乳素抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1753R Anti-Prolylhydroxylase 脯氨酸羥化酶抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1754R Anti-PS-1 (Presennillin-1/S182)(NT) 早老素蛋白-1抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1755R Anti-PS-1(Presennillin-1/S182)(CT) 早老素蛋白-1抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1756R Anti-PS-1(Presennillin-1/S182)(NT) 早老素蛋白-1抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1757R Anti-PSA (anti-Prostate Specific Antigen (PSA) , for conjugation and detection) 鼠抗人前列腺特異性抗原抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1758R Anti-PSCA (Prostate Stem Cell Antigen) 抗前列腺干細胞抗原抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1759R Anti-PSD-95 突觸后密度蛋白95抗體 0.1ml/0.2ml
qy-1760R Anti-P-selectin P選擇素抗體 0.1ml/0.2ml