產(chǎn)品名稱:人葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
英文名稱:Staphylococcus hominisPCR
規(guī)格:詳見說(shuō)明書
類別:PCR檢測(cè)試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。?
性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測(cè)試劑盒。
.試劑盒檢測(cè)特異性為00%
2. 檢測(cè)試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
?
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
?pSUPER-basic英文名(EN):2,3-Dichloro--propene,≥99%CAS No.:78-88-6規(guī)格(SP):0G類別(Key):通用試劑
pSUPER.puro英文名(EN):,3-Dichloropropene,≥98%CAS No.:542-75-6規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
pSUPER-retro-neo英文名(EN):Allyl bromide,99%CAS No.:06-95-6規(guī)格(SP):00G類別(Key):通用試劑
pSUPER-retro-puro英文名(EN):2-Bromopropene,99%CAS No.:557-93-7規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
pBAD His A英文名(EN):2,3-Dibromopropene,≥95.0%CAS No.:53-3-5規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
pSUPER-retro-GFP/Neo英文名(EN):-Bromo--propene,98%CAS No.:590-4-7規(guī)格(SP):5ML類別(Key):通用試劑
pSUPER-EGFP英文名(EN):Cyclohexene,99%CAS No.:0-83-8規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
pSUPER-GFP-neo英文名(EN):Cyclohexene oxide,98%CAS No.:286-20-4規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
pSUPERIOR.puro英文名(EN):3-Bromocyclohexene,90%CAS No.:52-5-3規(guī)格(SP):0ML類別(Key):通用試劑
pSUPER-puro英文名(EN):-Acetyl--cyclohexene,97%CAS No.:932-66-規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
pSUPER-retro-EGFP英文名(EN):-Heptene,97%CAS No.:592-76-7規(guī)格(SP):25ML類別(Key):通用試劑
pSV-beta-gal英文名(EN):-Octene,97%CAS No.:-66-0規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
pSV278英文名(EN):Cyclopentene,96%CAS No.:42-29-0規(guī)格(SP):50ML類別(Key):通用試劑
pSV2neo英文名(EN):Acenaphthylene,99%CAS No.:208-96-8規(guī)格(SP):00MG類別(Key):通用試劑
pSV-beta-galactosidase英文名(EN):Dicyclopentadiene, ≥95.0%CAS No.:77-73-6規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
pSV3neo英文名(EN):Isopropenylbenzene,99%CAS No.:98-83-9規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
pSwitch英文名(EN):α-Pinene, ≥98.0%CAS No.:7785-26-4規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
PT2/GFP英文名(EN):β-Pinene,99%CAS No.:872-67-3規(guī)格(SP):00ML類別(Key):通用試劑
人葡萄球菌PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格肌氨酸 規(guī)格:.5g Carboxymethylcellulose Sodium
BOC- 規(guī)格:00mg Povidone
馬尿酸-L-苯 規(guī)格:00mg Crospovidone
雙甘氨肽 規(guī)格:g Polyisobutylene
甲酯鹽酸鹽 規(guī)格:g Polyvinyl Acetate
乙酯鹽酸鹽 規(guī)格:g Polyvinyl Acetate Dispersion
磷脂酰 規(guī)格:3 strips Homopolymer Polypropylene
6-氨基正己酸 規(guī)格:200ml Octoxynol 9
復(fù)合氨基酸粉 規(guī)格:00mg Polyvinyl Alcohol
Na-苯甲酰-L-乙酯鹽酸鹽 規(guī)格:3 strips High Density Polyethylene
Na-苯甲酰-L-精氨酰鹽酸鹽 規(guī)格:3 strips Low-Density Polyethylene
N-苯甲酰-L-酪氨酰乙酯 規(guī)格:g
Na-對(duì)甲苯磺酰-L-甲酯鹽酸鹽 規(guī)格: vial Chorionic Gonadotropin
Na-對(duì)甲苯磺酰-L-賴氨酸氯甲基鹽酸鹽 規(guī)格:5 vails Corticotropin
Na-對(duì)甲苯磺酰-L-苯氯甲基 規(guī)格:g Papain