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廣電計量檢測集團股份有限公司

羊抗人血清抗體

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具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱上海谷研實業(yè)有限公司
  • 品       牌
  • 型       號
  • 所  在  地上海市
  • 廠商性質代理商
  • 更新時間2021/12/28 17:07:42
  • 訪問次數(shù)895
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上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產品。    


公司客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術公司和食品工業(yè)等單位。


公司主推品牌: (進口、國產) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。







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羊抗人血清抗體,抗體種類,多種試劑現(xiàn)貨供應!
羊抗人血清抗體 產品信息

羊抗人血清抗體*,羊抗人血清抗體用于免疫組化實驗,WB實驗,相應的標記抗體有HRP標記抗體,F(xiàn)ITC標記,BIO等。

【貯存條件】: 貯存于-20℃. 本品應在低溫下保存,長時間在暴露在空氣中,含量會有所降低。

規(guī)格:0.5ml

材料和方法

  . 材料 人成骨肉瘤MG63細胞為本實驗室保存。重組質粒MycSSHL(WT)、MycSSHL(S937A S978A/2SA)以及recombinant cofilinHis6由王巖教授惠贈。脂質體 2000( Invitrogen公司)。高糖DMEM培養(yǎng)基(美國Gibco 公司),胎牛血清(Hyclone公司),*和EDTA(Sigma 公司)。A2387,KN93,CaM,重組Ca2+/CaMK Ⅱ(Rat Brain,Calbiochem)。抗體:Myc (9E0;Roche),HA (3F0;Roche),Pcofilin,Cofilin(Santa Cruz), CaMKⅡδδ4 (Trans Genic Inc.),PCaMKⅡα/β(Thr286/287;Upstate)。免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒(邁晨科技有限公司)。

  .2 蛋白印跡實驗 MG63細胞鋪于35 mmol/L培養(yǎng)皿中,待細胞密度達到60%~70%時,轉染MycSSHL,48 h后換無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)3 h,分別加入濃度為0.5,,2.5,5 μmol/L的A2387孵育0 min后裂解細胞,離心取上清加入凝膠加樣緩沖液,沸水浴上加熱5 min,上樣、電泳、轉膜、雜交〔一抗分別為Pcofilin、Cofilin、PCaMK Ⅱ δ及CaMK Ⅱ δ(4)〕、ECL顯色。

  .3 體外激酶測定 MycSSHL(WT)及其突變體MycSSHL(2 SA)分別轉染至MG63細胞,48 h后采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體,對照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL,加入0.6 μg/ml重組活性CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93)以及00 μmol/L ATP、5 μCi〔γ32P〕ATP 于 20 μl 激酶反應緩沖液中,30℃反應40 min。反應產物進行SDSPAGE電泳、轉膜,應用放射自顯影技術檢測32P 標記的SSHL水平。

  .4 體外SSHL磷酸酶活性測定實驗 MycSSHL(WT)或MycSSHL (2 SA)轉染至MG63細胞,48 h后,采用免疫共沉淀(Protein Gagarose)試劑盒的方法及抗cmyc抗體,對照組為抗IgG抗體。回收MycSSHL,加入0.6 μg/ml CaMKⅡ(單獨或同時加入抑制劑KN93),20 μg/ml CaM,以及 6.3 μg/ml cofilinHis6 于 20 μl 反應緩沖液(50 mol/L HEPES,pH 7.4,0. mol/L CaCl2,0.5 mol/L EDTA,3 mol/L MgCl2,00 mmol/L NaCl, mol/L dithiothreitol,0.5 mg/ml BSA, μg/ml leupeptin),中30℃反應2 h。反應產物進行SDSPAGE電泳、轉膜、雜交(一抗分別為Pcofilin,Cofilin, cmyc 抗體)、ECL顯色。

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