北京諾博萊德科技有限公司供應SDS裂解液 NobleRyder P0912;現貨供應SDS裂解液 NobleRyder 量大優惠,咨詢 : 1215878164
產品簡介:
產品編號 | 產品名稱 | 產品包裝 | 產品價格 |
P0912 | SDS裂解液 | 100ml | 220.00元 |
我們生產的SDS裂解液(SDS Lysis Buffer)是一種比較強烈的細胞組織裂解液。SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、ChIP(染色質免疫共沉淀,chromatin immunoprecipitation)等。
關于我們生產的不同的裂解液的主要特點和差異,以及如何選擇裂解液可參考附錄。
SDS裂解液的主要成分為50mM Tris(pH8.1),1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate,25mM β-glycerophosphate,1mM EDTA,1mM Na3VO4,0.5 ug/ml leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
用SDS裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用我們生產的BCA蛋白濃度測定試劑盒測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的去垢劑,不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
包裝清單:
產品編號 | 產品名稱 | 包裝 |
P0912 | SDS裂解液 | 100ml |
| PMSF(100mM) | 1.5ml |
— | 說明書 | 1份 |
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
注意事項:
為取得*的使用效果,盡量避免過多的反復凍融。可以適當分裝后使用。
裂解樣品的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
關于裂解液的選擇,一方面可以參考我們生產的各種裂解液主要特點、差異,選擇合適的裂解液;另一方面也需要通過一些預實驗來摸索*的適合您實驗條件的裂解液。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用說明:
對于培養細胞樣品:
1. 融解SDS裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。
2. 對于貼壁細胞:去除培養液,用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞1-2秒后,細胞就會被裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上繼續裂解10分鐘。
對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。如果細胞量較多,必需分裝成50-100萬細胞/管,然后再裂解。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上繼續裂解10分鐘。
3. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和ChIP等操作。
裂解液用量說明:通常6孔板每孔細胞加入150微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量到200微升或250微升。如果用于ChIP,建議6孔板每孔細胞至少加入200微升裂解液。
對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解SDS裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。
3. 按照每20毫克組織加入150--250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。如果用于ChIP,初步裂解后需在冰浴上繼續裂解10分鐘。
5. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進行后續的PAGE、Western和ChIP等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區,是一家專業從事生化試劑、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發、銷售、服務為一體的生物科技公司,公司主要經營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz,Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關試劑、細胞培養及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。