Phos-tag™ Acrylamide SDS-PAGE可根據遷移率不同,區分磷酸化蛋白與非磷酸化蛋白。該方法只需在常規的SDS-PAGE膠中添加Phos-tag™ Acrylamide和MnCl2即可進行實驗(制膠過程中添加,如需詳細說明請)。
特點
# 非放射性元素,非熒光物質
# 磷酸化蛋白亞型可以在同一電泳道分離出多條帶
# 操作簡便,與常規SDS-PAGE蛋白電泳相似
# Phos-tag™ 的結合特異性與氨基酸種類、序列無關
# Phos-tag™ SDS-PAGE實驗后,可進行常規的免疫組化、質譜等
# 性質穩定,溶于蒸餾水后可以穩定保存至少3個月
# 磷酸化和非磷酸化蛋白可以同時被分離檢測
# 不同位點磷酸化修飾以及磷酸化程度不同的蛋白在同一泳道中因遷移率不同而被分離開來
磷酸基團親和電泳試劑 Phos-tag™ Acrylamide
原理
應用(使用*激酶AbI觀測磷酸化反應的經時變化)
*激酶AbI作用于帶有GST標簽的底物多肽Abltide,分別進行常規SDS-PAGE和Phos-tag™SDS-PAGE。
結果對比:
常規的SDS-PAGE(上左圖:不存在Phos-tag™)不能確認底物是否被磷酸化。
Phos-tag™的SDS-PAGE(上右圖:100uM Phos-tag™)里,隨著磷酸化反應的進行,電泳速度慢的條帶慢慢出現,相對應對照的電泳速度快的條帶逐漸減少。
相關產品
品名 | 貨號 | 包裝 | 用途 |
Phos-tag(TM) Acrylamide AAL-107 | 300-93523 | 2mg | 按磷酸化程度不同特異性分離磷酸化蛋白 |
304-93521 | 10mg | ||
Phos-tag™ Acrylamide 5mM Aqeuous Solution | 304-93526 | 0.3ml |
以上產品均用于科研,不可用于診斷或人體
高榮娟(可24小時短信服務,垂詢)
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