細(xì)胞名稱：人口腔上皮癌細(xì)胞，KB細(xì)胞

人口腔上皮癌細(xì)胞，KB細(xì)胞

傳代方法：
收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)：如果沒長(zhǎng)滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁細(xì)胞傳代方法：
1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的*（含0.02%EDTA），讓*與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化，待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細(xì)胞傳代方法：
可以直接傳代也可以離心法傳代。
1.直接傳代是讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。
2.離心法傳代是將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，1000rpm，5 分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細(xì)胞形成細(xì)胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。一般沒有特殊說明，細(xì)胞一般是一傳二。

凍存方法：
90%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
儲(chǔ)存：液氮中*保存。
注：1 觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。
    2.在運(yùn)輸過程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
    3.收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等，請(qǐng)盡快與我們。

常見問題及解決方案：
1、培養(yǎng)瓶有破裂，培養(yǎng)液有漏液：細(xì)胞*可能會(huì)污染，所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2、細(xì)胞漂浮：培養(yǎng)瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察，如細(xì)胞大部分又貼回瓶底，表明細(xì)胞活力正常，剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉，留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察，細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%，進(jìn)行消化傳代；如細(xì)胞還是不貼壁，將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶，原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，中間注意觀察，我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo)，直到問題解決。

我公司還可提供一下細(xì)胞株：