細胞名稱：人小細胞肺癌細胞，NCI-H446細胞

人小細胞肺癌細胞，NCI-H446細胞

傳代方法：
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態：如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培養液，繼續培養。
如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續培養。

貼壁細胞傳代方法：
1 棄去培養基，用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的*（含0.02%EDTA），讓*與大部分細胞接觸后放入37℃培養箱內，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓后加*培養基終止消化。

懸浮細胞傳代方法：
可以直接傳代也可以離心法傳代。
1.直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。
2.離心法傳代是將細胞連同培養液一并轉移到離心管內，1000rpm，5 分鐘，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。

凍存方法：
90%FBS，10%DMSO，現用現配。
儲存：液氮中*保存。
注：1 觀察細胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。
    2.在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養。
    3.收到細胞后若發現培養瓶破損、細胞污染等，請盡快與我們。

常見問題及解決方案：
1、培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞*可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。
2、細胞漂浮：培養瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留10ml培養液培養觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。

我公司還可提供一下細胞株：