蛋白質的磷酸化修飾是生物體內重要的共價翻譯后修飾,可調控目標蛋白的功能，定位，特異性結合。蛋白質的磷酸化狀態（也稱磷酸蛋白組學）對于評估不同的生物和病理過程非常重要。2002年，廣島大學的小池教授及其團隊發表了一個雙環金屬絡合物（1,3-bis[bis（pyridin-2-ylmethyl）amino]propan-2- olato dizinc（II） complex）在中性條件下作可選擇性結合磷酸化標簽分子，即Phos-tagTM。此后，各種磷酸蛋白質組學研究方法，在使用Phos-tagTM的衍生物后得到了發展。

Phos-tagTM 系列S是特異性結合磷酸化離子的一種功能性分子，具有以下特點：

1.與磷酸離子（2-）的選擇性結合能力強于其他陰離子

2.在生理條件下（PH5-8）形成穩定的化合物

1. Phos-tag? Acrylamide

Phos-tag? Acrylamide SDS-PAGE可根據遷移率不同，區分磷酸化蛋白與非磷酸化蛋白。該方法只需在常規的SDS-PAGE膠中添加Phos-tag? Acrylamide和MnCl2即可進行實驗（在制膠過程中添加，如需詳細說明請）。

特點# 非放射性元素，非熒光物質

# 磷酸化蛋白亞型可以在同一電泳道分離出多條帶

# 操作簡便，與常規SDS-PAGE蛋白電泳相似

# Phos-tag? 的結合特異性與氨基酸種類、序列無關

# Phos-tag? SDS-PAGE實驗后，可進行常規的免疫組化、質譜等

# 性質穩定，溶于蒸餾水后可以穩定保存至少3個月

# 磷酸化和非磷酸化蛋白可以同時被分離檢測

# 不同位點磷酸化修飾以及磷酸化程度不同的蛋白在同一泳道中因遷移率不同而被分離開來

原理

應用

2. SuperSepTM Phos-tag? 磷酸化蛋白電泳預制膠

加入Phos-tagTM的預制膠，打開包裝即可使用。含有鋅作為補充金屬。中性膠緩沖液保證了儲存的穩定性。

板尺寸：100*100*3（mm）

膠尺寸：90*85*1（mm）

孔數：13孔

上樣量：30ul

特點：

# 使用方便，開袋即用
# 相比使用Phos-tag? 自己手動制膠，分離效果更好，穩定性更高

3. Phos-tag? Biotin *共軛的Phos-tag，用于磷酸化蛋白的WB檢測

用于免疫印跡檢測磷酸化蛋白

特點：1. 可用于所有的磷酸化蛋白檢測

2. 與普通WB檢測相似。但無需使用磷酸化抗體

4. Phos-tag? Agarose 柱層析分離磷酸化蛋白

Phos-tag? Agarose用于磷酸化蛋白通過柱層析富集，分離，純化。不使用表面活性劑或還原劑，磷酸化蛋白可以在一個類似體內環境下獲得。

特點：

1. 純化時間只需約1小時

2. 蛋白可在生理條件（PH7.5）下捕獲

3. 無需表面活性劑和還原劑

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