分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體） 分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞 ，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測。
（7）流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
ETHYL 4-CHLOROPHENYLACETATE 4-乙酸乙酯 14062-24-9
ethylsulfanylMethanethioaMide 625-61-6
ETHYLTRIBUTYLTIN 19411-60-0
EthyltriMethyllead 乙基*基鉛 1762-26-1
ELASTATINAL （2S）-2-[（4S）-2-氨基-1,4,5,6-四羥基4-嘧啶基]-N-[[[（1S）-1-羰基-3-甲基丁基]氨基]羰基]甘氨酰-N1-[（1S）-1-甲基-2-氧乙基-L-*甲酰胺 51798-45-9
ELEDOISIN 依來多辛 69-25-0
ELEMENE 欖[香]烯 30824-67-0
Eletriptan 依來曲普坦 143322-58-1
ELLIPTICINE 橢圓玫瑰樹堿 519-23-3
SodiuM xylan polysulfate 硫酸戊聚糖鈉 37319-17-8
Eltoprazine hydrochloride 1-（2,3-二氫-1,4-苯并二烷-5-基）哌嗪鹽酸鹽 98224-03-4
EMbelin 恩貝酸/恩貝靈 550-24-3
eMbutraMide 15687-14-6
EMoxipin 77702-17-1
Enalkiren 依那吉侖 113082-98-7
ENDURACIDIN HYDROCHLORIDE 恩拉霉素 11115-82-5
Eniluracil; ADH-300004; GW-776 59989-18-3
ent-16beta,17-Dihydroxy-19-kauraic acid ENT-16BETA,17-DIHYDROXY-19-KAURANOIC ACID 3301-61-9
Entecavir hydrate *一水合物 209216-23-9
Enviradene 恩韋*** 80883-55-2
ETHYL ALL CIS-5,8,11,14,17- EICOSAPENTAENOATE 順-二十碳五烯酸乙酯 86227-47-6
Epichlorohydrin-1,1-d2 83385-55-1
EPICHLOROHYDRIN-2-D1 表氯醇-2-D 70735-27-2
EPICHLOROHYDRIN-D5 氘代環(huán)氧氯丙烷 69533-54-6
Epicriptine 表隱亭 88660-47-3
EPINEPHRINE BITARTRATE 酒石酸腎上腺素 51-42-3
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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分泌A2抗體B淋巴細(xì)胞 產(chǎn)品信息
關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞儀
