NCI-N87人胃癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）NCI-N87人胃癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離 心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
Ethynylestradiol-3-sulfate 24560-70-1
ETHYNYLFERROCENE 二茂鐵乙炔 1271-47-2
LevetiracetaM RaceMic Mixture EtiracetaM 乙拉西坦 33996-58-6
ETORPHINE 乙烯啡 14521-96-1
EUK 207 EUK 207 478020-50-7
EUK-189 N,N'-雙（3-乙氧基亞水楊基）-1,2-乙二胺-錳（II） 186350-27-6
EUPERGIT（R） C SPHERES 聚丙烯酸載體C 93356-75-3
Evening PriMrose Oil * 90028-66-3
英文名稱 中文名稱 CAS號(hào)
dodecyl propionate 6221-93-8
dofequidar 1-[4-[2-羥基-3-（5-喹啉基氧基）丙基]-1-哌嗪基]-2,2-二苯基乙酮 129716-58-1
DOWEX（R） 504 HYDROGEN FORM 二乙烯基苯與磺化（苯乙烯和乙烯基乙苯）的聚合物 69011-20-7
Doxantrazole 3-（1H-四唑-5-基）-9H-噻噸-9-酮 10,10-二氧化物 51762-95-9
Doxorubicin Hydrochloride 鹽酸* 25316-40-9
DoxylaMine Succinate USP 琥珀酸多西拉敏 562-10-7
D-PenicillaMine D-* 52-67-5
viquidil 維喹地爾 84-55-9
D-RhaMnose D-鼠李糖 634-74-2
D-RIBOSE-5-PHOSPHATE DISODIUM SALT D-核糖-5-磷酸二鈉鹽 18265-46-8
DriselaseBasidioMycetes sp. 崩潰酶 85186-71-6
D-SACCHARIC ACID 1,4-LACTONE 糖質(zhì)酸-1,4-內(nèi)酯 389-36-6
d-StreptaMine, O-2-aMino-2,3-dideoxy-alpha-d-ribo-hexopyranosyl-（1->4）-O-[O-alpha-d-Mannopyranosyl-（1->4）-O-2,6-diaMino-2,6-dideoxy-beta-l-idopyranosyl-（1->3）-beta-d-ribofuranosyl-（1->5）]-2-deoxy-, sulfate （salt） 54911-32-9
D-TAGATOSE 塔格糖 87-81-0
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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NCI-N87人胃癌細(xì)胞 產(chǎn)品信息
關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞儀
