PLC/PRF/5肝癌亞力山大細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清，ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優等胎牛血清，標準胎牛血清，gibco特優級胎牛血清血清，新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體（FITC標記抗體）PLC/PRF/5肝癌亞力山大細胞：
（1） 收集1×106個細胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體（5×105個細胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法：
（1）收集2×106個細胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細胞，800rpm離心5min，洗去未結合一抗，重復一次。
（5）加入熒光標記（FITC）標記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞；固定待測。
（7）流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時。
（3）調整細胞濃度為106細胞/毫升，取1毫升細胞懸液，用PBS洗三次，細胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產品：
lithosperMic acid 紫草酸 28831-65-4
lithosperMic acid B 丹酚酸 B 121521-90-2
Hederacoside C 常春藤苷 C 14216-03-6
HeMatite 76774-74-8
HeMin 血晶素 16009-13-5
FLEZELASTINE [INN] 氟卓斯汀 135381-77-0
FloMoxef * 99665-00-6
FloMoxef sodiuM *鈉 92823-03-5
FLORIFENINE 氟非寧 83863-79-0
Fludarabine 氟達拉賓 21679-14-1
fluMecinol 氟美西諾 56430-99-0
FluMethasone 氟米松 2135-17-3
FluMethrin 氟氯苯菊酯 69770-45-2
Fluocinolone Acetonide 醋酸膚輕松 67-73-2
FLUORENE-9-BISPHENOL 雙酚芴 3236-71-3
Fluorescein 熒光素 2321/7/5
Ethanone, 1-（2-benzoxazolyl）- （9CI） 1-（2-苯噁唑基）-乙酮 122433-29-8
Ethanone, 1-[4-（broMoMethyl）phenyl]- 1-（4-（溴甲基）苯基）乙酮 51229-51-7
Ethanone, 2-chloro-1-cyclopentyl- （9CI） 2-氯-1-環戊基乙酮 932-28-5
Ethanone,1-（2,4-dichlorophenyl）-2-（5-Methyl-1H-iMidazol-2-yl）- 252953-85-8
Ethanone,1-（3,4-diMethyl-2-pyridinyl）-） 110788-52-8
ETHANONE,1-（4-PIPERIDINYL）-,HYDROCHLORIE （1 : 1） 1-（4-哌啶基）乙酮鹽酸鹽 89895-06-7
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養基＋１０％ＤＭＳＯ（現用現配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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PLC/PRF/5肝癌亞力山大細胞 產品信息
關鍵詞：流式細胞儀
