HCCLM3肝癌細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清，ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優等胎牛血清，標準胎牛血清，gibco特優級胎牛血清血清，新生牛血清。
細胞術檢測樣品制備方法
直接標記抗體（FITC標記抗體）HCCLM3肝癌細胞：
（1） 收集1×106個細胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體（5×105個細胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法：
（1）收集2×106個細胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細胞，800rpm離心5min，洗去未結合一抗，重復一次。
（5）加入熒光標記（FITC）標記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞；固定待測。
（7）流式細胞儀檢測熒光值,每管計數10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時。
（3）調整細胞濃度為106細胞/毫升，取1毫升細胞懸液，用PBS洗三次，細胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產品：
Fluorescein SodiuM * 518-47-8
FLUORESCENT YELLOW AA223 2-（7-二乙基氨基）-2-氧代-2H-1-苯并吡喃-3-基）-5-苯并惡唑亞磺酰胺 68427-35-0
Fluorine 氟 7782-41-4
SODIUM FLUOROACETATE 62-74-8
FLUOROL YELLOW 088 2,8-二甲基-萘并[3,2,1-KL]占噸 81-37-8
Fluoxastrobin {2-[6-（2-氯苯氧基）-5-氟嘧啶-4-基氧]苯基}（5,6-二氫-1,4,2-二噁嗪-3-基）甲酮O-甲基肟 193740-76-0
Flupirtine 氟吡汀 56995-20-1
Flupirtine Maleate 馬來酸氟吡汀 75507-68-5
Fluroxypyr 氯氟吡氧乙酸 69377-81-7
Fluticasone Furoate 397864-44-7
Fluvastatin N-Ethyl SodiuM Salt （Fluvastatin IMpurity） 93936-64-2
FMoc-9-aMino-4,7-dioxanonanoic acid FMOC-11-氨基-3,6,9-三氧雜十一酸 139338-72-0
FMOC-ARG（ALOC）2-OH FMOC-ARG（ALOC）2-OH 148893-34-9
FMOC-ARG（BOC）2-OH N-芴甲氧羰基-N',N''-二叔丁氧羰基-L-* 143824-77-5
FMOC-Arg（Pbf）-OH Fmoc-Pbf-* 154445-77-9
FMoc-Cys-（pMeBzl）-OH N-芴甲氧羰基-S-（4-甲基芐基）-L-半* 136050-67-4
FMoc-D-2-Nal-OH Fmoc-3-（2-萘基）-D-* 138774-94-4
FMOC-D-ARG（BOC）2-OH N-[（9H-芴-9-基甲基）羰基]-N',N''-二[叔丁氧羰基]-D-* 214852-34-3
FMOC-GLU（OCHX）-OH （2S）-5-（環己氧基）-2-[[（9H-芴-9-基甲氧基）羰基]氨基]-5-氧代戊酸 150047-85-1
FMoc-Glu-Obzl FMOC-L-*-Α-芐酯 122350-52-1
FMOC-HIS（BOC）-OH FMOC-BOC-* 81379-52-4
FMOC-L-PHE（4-CH2-SO3H） 206060-45-9
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養基＋１０％ＤＭＳＯ（現用現配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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HCCLM3肝癌細胞 產品信息
關鍵詞：流式細胞儀
