HFL-IMEMα胚肺成纖維細胞上海谷研科技有限公司的原代細胞株及血清，ATCC細胞株、hyclone澳洲特級胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標準胎牛血清，gibco特優(yōu)級胎牛血清血清，新生牛血清。
細胞術(shù)檢測樣品制備方法
直接標記抗體（FITC標記抗體HFL-IMEMα胚肺成纖維細胞）：
（1） 收集1×106個細胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞，800rpm離HFL-IMEMα胚肺成纖維細胞心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體（5×105個細胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測即可。
（4） 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]
未標記抗體間接免疫熒光標記法：
（1）收集2×106個細胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標記（FITC）標記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞；固定待測。
（7）流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測樣本制成單細胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時。
（3）調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升，取1毫升細胞懸液，用PBS洗三次，細胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
Spiro[9H-benzo[a]fluorene-9,2 貝母辛 19773-24-1
Spiro[isobenzofuran-1（3H）,9'-[9H]xanthen]-3-one,3'-aMino-6'-hydroxy- 3086-44-0
squalaMine （3Β,5Α,7Α）-3-[[3-（（4-氨基丁基）氨基）丙基]氨基]膽甾烷-7,24-二醇24-氫硫酸酯 148717-90-2
squaMocin 120298-30-8
SR 11302 160162-42-5
SR 27897 136381-85-6
StalliMycin 司他霉素 636-47-5
starch acetate 淀粉乙酸酯 9045-28-7
STATIL 波來瑞斯 72702-95-5
STAUROSPORINE 星孢菌素 62996-74-1
Sterculic acid 蘋婆酸 738-87-4
Stevioside 甜葉菊甙元 471-80-7
STIGMALIN 91682-96-1
stilbaziuM iodide 司替碘銨 3784-99-4
STIROCAINIDE 司替卡尼 78372-27-7
Streptonigrin 棕霉素 3930-19-6
Streptozocin 鏈脲菌素 18883-66-4
Strictosidine 20824-29-7
STRONTIUM 碲化鍶 12040-08-3
StrontiuM Carbonate 碳酸鍶 1633-05-2
StrontiuM Nitride, Sr3N2, Powder 12033-82-8
STYLOPINE, （+/-）-（P） 84-39-9
STYRALLYL ISO BUTYRATE 2-甲基丙酸-1-苯乙酯 7775-39-5
細胞凍存
１．將細胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時。不能超過1小時。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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HFL-IMEMα胚肺成纖維細胞 產(chǎn)品信息
關(guān)鍵詞：流式細胞儀
