MFC胃癌細(xì)胞上海谷研科技有限公司的原代細(xì)胞株及血清，ATCC細(xì)胞株、hyclone澳洲特級(jí)胎牛血清，優(yōu)等胎牛血清，標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清，gibco特優(yōu)級(jí)胎牛血清血清，新生牛血清。
細(xì)胞術(shù)檢測(cè)樣品制備方法
直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）MFC胃癌細(xì)胞：
（1） 收集1×106個(gè)細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。
（2） 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。
（3） 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體（5×105個(gè)細(xì)胞/20ul抗體）的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定，待測(cè)即可。
（4） 用流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。[2]
未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：
（1）收集2×106個(gè)細(xì)胞，用冷的PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。
（2）用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2ml PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；
（3）用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。
（4）加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS 重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。
（5）加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。
（6）加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測(cè)。
（7）流式細(xì)胞儀檢測(cè)熒光值,每管計(jì)數(shù)10 000個(gè)細(xì)胞。
細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：
（1）待測(cè)樣本制成單細(xì)胞懸液，然后200g離心5分鐘，棄上清。
（2）用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存 ，至少固定18小時(shí)。
（3）調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進(jìn)行流式分析。
（4）PI染液終濃度為50微克/毫升，RNase A終濃度為20微克/毫升。
其他*產(chǎn)品：
KEROSENE C5-20正鏈烷石蠟 64771-72-8
Ammonium nitrate 6484-52-2
CALCIUM SACCHARIN 糖精鈣 6485-34-3
750 graMs 順式-2,6-二甲基嗎啉 6485-55-8
（TETRAHYDRO-PYRAN-4-YL）-ACETALDEHYDE 四氫吡喃-4-乙醛 65626-23-5
4-tridecenyl acetate 煤焦油 65996-93-2
3-oxetanon 3-氧雜環(huán)丁酮 6704-31-0
D-alpha-Amino-beta-phenylpropionic acid D-苯* 673-06-3
5-BROMO-1H-1,2,4-TRIAZOLE-3-CARBOXYLIC ACID 5-溴-1H-1,2,4-三唑-3-甲酸 674287-63-9
Cyanuric fluoride 三聚氟氰 675-14-9
4-BROMOINDOLE-1-CARBOXYLIC ACID TERT-BUTYL ESTER 4-溴吲哚-1-羧基 酸 叔-丁基 酯 676448-17-2
Isepamicin sulfate 硫酸* 67814-76-0
C12-15 PARETH-2 C12-15 鏈烷醇聚醚-2 68131-39-5
Fatty acids, C18-unsatd., dimers, reaction products with polyethylenepolyamines 聚酰胺樹脂 68410-23-1
SODIUM LAURYL ETHER SULFATE 月桂基聚氧乙烯醚硫酸鈉 68585-34-2
Sodium [（2,3-dihydro-1,5-dimethyl-3-oxo-2-phenyl-1H-pyrazol-4-yl）methylamino]methanesulfonate * 68-89-3
（R）-4-AMINO-3-（4-CHLOROPHENYL）BUTANOIC ACID （R）-* 69308-37-8
liquid,100Ml 辛氧基ganyou 70445-33-9
cyanidin-3-glucoside 2-（3,4-二羥基苯基）-3-（β-D-吡喃葡萄糖氧基）-5,7-二羥基-1-苯并氯化物 7084-24-4
Octenidine 奧替尼啶 71251-02-0
ARTEPILLIN C500Mg, 1g, 5g. 蒿素C 72944-19-5
Decanedioic acid,3-hydroxy- 73141-46-5
細(xì)胞凍存
１．將細(xì)胞消化下來，移入離心管離心，棄上清
２．準(zhǔn)備凍存液比例：５０％ＦＢＳ＋４０％培養(yǎng)基＋１０％ＤＭＳＯ（現(xiàn)用現(xiàn)配）
３．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)．
放入－２０度冰箱２－４小時(shí)后．再放入－８０度冰箱過夜，第二天放入液氮罐保存
原則 慢凍速溶
４．加１．５凍存液在離心管中，將細(xì)胞吹打均勻，移入凍存管內(nèi)。
凍存時(shí)間。放入4度冰箱10分鐘。再放入-20度冰箱30分鐘-1小時(shí)。不能超過1小時(shí)。zui后放入-80度冰箱過夜。第二天放入液氮中。
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MFC胃癌細(xì)胞 產(chǎn)品信息
關(guān)鍵詞：流式細(xì)胞儀
