豬衣原體抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫法）
【包裝規(guī)格】 96T/盒
【預期用途】
本試劑盒用于檢測豬血清中豬衣原體抗體，評估豬場豬衣原體疫苗免疫狀況。
【原    理】
本試劑盒系由預包被豬衣原體蛋白的微孔板和酶標記二抗及其他配套試劑組成，應用酶聯(lián)免疫法（ELISA）原理檢測豬血清或血漿中豬衣原體特異性抗體。實驗時，在包被板中加入對照血清和稀釋的待檢血清，經溫育后，若樣品中含有豬衣原體病毒的特異性抗體，則將與包被板上抗原結合，經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后；再加入酶標二抗，與包被板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結合；再經洗滌除去未結合的酶結合物，在孔中加TMB底物液，與酶反應形成藍色產物，顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關；加入終止液終止反應后，產物變?yōu)辄S色；用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值，即可知樣品是否含有特異性抗體。
【豬衣原體抗體檢測試劑盒儲存及有效期】
于2～8℃避光保存，有效期為12個月。
包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月。
【試劑盒組成】
1.豬衣原體病毒抗原預包被微孔板條  96T
2.酶標記物  （紅蓋）  11ml×1
3.樣品稀釋液  （黃蓋）  50ml×1
4.20X濃縮洗滌液  （透明蓋） 40ml×1
5.底物液A  （白蓋）  11ml×1
6.底物液B  （黑蓋）  11ml×1 
7.終止液  （黃蓋）  11ml×1
8.陽性對照 （紅蓋，已滅活）  1 ml×1
9.陰性對照 （綠蓋，已滅活）  1 ml×1
10.蓋板膜  1張 
11.自封袋  1個
12.說明書  1份 
【樣品制備】  取動物全血，按常規(guī)方法制備血清，要求血清清亮，無溶血、無污染。樣品短期可于2～8℃保存，*需置-20℃保存。
【樣品稀釋】  用樣品稀釋液將待檢血清按1：100倍稀釋（如5μl血清加入495ul樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。
【洗滌液配制】濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫（25℃左右），并搖動使沉淀的鹽溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
【試驗操作方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量微孔板條，設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl；陰性/陽性對照孔分別加入陰性/陽性對照血清100μl；樣品孔每孔加入稀釋后的血清樣品100μl。
4.混勻，置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌，同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl，混勻，用空白孔調零，于450nm（630nm作參比波長）測定各孔吸光值（A450）。
【結果判定】
陰性對照呈無色或淺黃色，陽性對照呈明顯黃色，表示試驗有效。
以空白對照調零，用酶標儀于450nm（630nm作參比波長）讀取吸光度（A值）。待檢孔A值大于陰性對照A值平均值的2.1倍者判為陽性。如陰性對照A值的平均值低于0.08時按0.08計算。