關于客戶在收到細胞后正確的處理方法
羊膜上皮細胞細胞，HuAECs-11細胞
有經驗和剛剛從事細胞培養(yǎng)工作的人員都應該認真仔細地詢問下細胞提供方提供的建議，提前了解所要培養(yǎng)細胞的詳細資料，準備好細胞所要用到的培養(yǎng)基和相關試劑，雖然所有的貼壁，半貼壁或者懸浮細胞處理方式差不多，但是不同的實驗室培養(yǎng)條件和處理力度還有試劑的批間差這些問題存在，也會導致對細胞處理不當，或者環(huán)境的不適應而造成細胞的死亡。
羊膜上皮細胞細胞，HuAECs-11細胞
1.收到細胞，*時間要鏡檢：觀察細胞形態(tài)是否正常，對于貼壁細胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細胞密度，有疑議及時咨提供細胞的技術人員。由于運輸?shù)臅r間或者溫度的變化，很多貼壁細胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長的狀態(tài)和平時會有點不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會發(fā)生大片的脫落，細胞聚集在一起，但是細胞生長還是正常的，通過離心收集，加以*的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長。
2.當通過上一步的觀察，細胞初步沒有任何問題時，進行下一步操作。當收到的細胞密達到80%左右時，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。細胞在低于正常生長溫度情況下，會調整為靜止期，或者慢速生*，必須恢復37度的環(huán)境至少3個小時左右，才能重新調整到接近對數(shù)生*的狀態(tài)，在對數(shù)生*進行細胞的傳代會大大增加傳代的成功率，和細胞的存活率。
3.如果經*步觀察發(fā)現(xiàn)細胞密度超過90%，并且細胞狀態(tài)很好時，則復溫后2個小時需要立即傳代。傳代的比例應依據(jù)不同的細胞而定。對于生長比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細胞可以一次多傳幾瓶；對于生長較慢，細胞比較薄，狀態(tài)容易波動的細胞類型，一次少傳些，保證每瓶細胞密度大些，便于穩(wěn)定生長。至于一些比較陌生的細胞，*次處理也可以依照第二種情況。
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：
如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內更換新鮮培
養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細胞已經長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。
傳代方法：
1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。
2 加1ml 0.25%的*（含0.02%EDTA），讓*與大部分細胞接觸后
放入37℃培養(yǎng)箱內，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變圓后加
*培養(yǎng)基終止消化。
3 一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。
凍存方法：
70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
儲存：液氮中*保存。
注1 觀察細胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。
2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落，可離
心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。
3 收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等，請及時與我們。
，還可供應細胞如下：
| SGC7901 | 人胃癌細胞 |
| MV.1.1n | MV.1.1n |
| Du145 | 人前列腺癌細胞 |
| CV-1 | 非洲綠猴腎細胞 |
| HCT116 | 人結腸癌細胞 |
| AGS | 人胃腺癌細胞 |
| Hela-Ap-1 | Hela-Ap-1 |
| Aspc-1 | 人轉移胰腺癌細胞 |
| MC3T3-L1 | 小鼠胚胎成纖維細胞 |
| 293T | 人胚腎細胞 |
| Bcap-37 | 人乳腺癌細胞 |
| C3H10 | 小鼠間充質干細胞系 |
| HCT8 | 人結腸癌細胞 |
| MGC-803 | 人胃癌細胞系 |
| 293host | 293host |
| PANC1 | 人胰腺癌細胞 |
| HL-60 | 人原髓細胞白血病細胞 |
| HCT-15 | 人結直腸腺癌細胞 |
| WT-MEF | WT-MEF |
| EGFP293T | EGFP293T |
| ACDC5 | ACDC5 |
| Lncap | 人前列腺癌細胞 |
| KBM5 | KBM5 |
| U266 | 人骨髓瘤細胞 |
| 293Ampho | 293Ampho |
| HE-MEF | HE-MEF |
| 2HO-MEF | 2HO-MEF |
| HCT116R | HCT116R |
| BJ | 人皮膚成纖維細胞 |
| HEK293T | 人胚腎細胞 |
| BGC-823 | 人胃腺癌細胞（低分化） |
| SGC7901 | 人胃癌*耐藥株 |
| C6 | 大鼠神經膠質瘤細胞 |
| ATDC5日本 | ATDC5 |
| U937 | 人白血病細胞 |
| ATDC5非日本 | ATDC5 |
| HGC7901 | HGC7901 |
| B16-F11 | B16-F11 |
| HCT116p53- | 人大腸直腸癌細胞株 |
| Bcap37 | 人乳腺癌細胞 |
| SMMC7721 | 人肝癌細胞 |
| QGC7701 | QGC7701 |
| LLC | 小鼠肺癌細胞 |
| 231-luc | 乳腺癌細胞 |
| 10T1 | 小鼠胚胎成纖維細胞 |
| SL4 | SL4 |
| HLIVEC | HLIVEC |
| HMEC-1 | 人微血管內皮細胞株 |
| CHOWT | CHOWT |
| CRL-2366M059J | CRL-2366M059J |
| TM40D+KFM | TM40D+KFM |
| TM40D | 小鼠乳腺癌細胞 |
| TM40D+GPG54 | TM40D+GPG54 |
| TM40D+Kiss2 | TM40D+Kiss2 |
| S311A | S311A |
| 2855 | 2855 |
| MCF-Her218 | MCF-Her218 |
| A7R5 | 大鼠主動脈平滑肌細胞 |
| P19 | 小鼠畸胎瘤細胞 |
| TARAB2.2 | TARAB2.2 |
| SRF- | SRF- |
| NCI-H460 | 人大細胞肺癌細胞 |
| B6S | B6S |
| Hut78 | 人T淋巴細胞白血病細胞 |
| SK-MES-1 | 人肺鱗癌細胞 |
| Cos7 | SV40轉化非洲綠猴腎細胞 |
| PC-3 | 人前列腺癌細胞 |
| Hep3B2.1 | 人肝癌細胞 |
| H9C2 | 大鼠心肌細胞 |
| H9C2 | 大鼠心肌細胞 |
| MDA-MB-231 | 人乳腺癌細胞 |
| LoVo | 人結腸癌細胞 |
| COLO205 | 人結腸癌細胞 |
| NIH3T3 | 小鼠胚胎成纖維細胞 |
| HA | 人星形膠質細胞 |
| MDA-MB-435S | 人乳腺癌高轉移細胞 |
| LO2 | 人結腸癌細胞 |
| Jukat | 人T淋巴細胞系 |
| MCF-7 | 人乳腺癌細胞 |
| SNU-398 | 人肝癌細胞 |
| SNU-449 | 人肝癌細胞 |
| SNU-182 | 人肝癌細胞 |
| SNU-475 | 人肝癌細胞 |
| SNU-387 | 人肝癌細胞 |
| SNU-423 | 人肝細胞癌 |
| Hep 3B2.1-7 | 人肝癌細胞 |
| NCI-H1755 | 人肺癌細胞 |
| C3A | 永生化肝細胞 |
| HEP G2/2.2.1 | 人肝癌細胞 |
| PLC/PRF/5 | 人肝癌亞力山大細胞 |
| Hepa1-6 | 小鼠肝癌細胞 |
| H4-II-E-C3 | 大鼠肝癌細胞 |
| HuH-7 | 人肝癌細胞 |
| HuH-6 | 人肝母細胞瘤細胞 |
| JTC-27 | 大鼠肝癌細胞 |
| HuH-28 | 人肝癌細胞 |
| THLE-2 | 人肝永生化細胞 |
| THLE-3 | 人肝永生化細胞 |
| Tera-1 | Tera-1 |
| Tera-2 | Tera-2 |
| HUVEC | 人臍靜脈血管內皮細胞 |
| NIH/3T3 | 小鼠胚胎細胞 |
| 293 [HEK-293] | 人胚腎細胞 |
| CHO | 中國倉鼠卵巢細胞 |
| Sp2/0-Ag14 | 小鼠骨髓瘤細胞 |
| K-562 | 人慢性髓原白血病細胞 |
| E.G7-OVA | E.G7-OVA |
| EL4 | 小鼠淋巴瘤細胞 |
| B16-F10 | 小鼠黑色素瘤細胞 |
| A-375 | 人黑色素瘤細胞 |
| NCI-H460 | 人肺癌細胞 |
| NCI-H1299 | 人非小細胞肺癌細胞 |
| NCI-H358 | 人非小細胞肺癌細胞 |
| LL/2 | 小鼠肺癌細胞 |
| 4T1 | 小鼠乳腺癌細胞 |
| MDA-MB-231 | 人乳腺癌細胞 |
