鼬肺上皮細(xì)胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
鼬肺上皮細(xì)胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細(xì)胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:褪黑素,N-乙酰-5-甲氧基色胺,松果體素,褪色素, Melatonin
L-亮氨醇,S-(+)--氨基-4-甲基--戊醇,L-Leucinol
L-ben"丙氨醇,(S)--ben"丙氨醇,L--氨基-3-ben"基--丙醇,L-Phenylalaninol
L-ben"丙氨醇,(S)--ben"丙氨醇,L--氨基-3-ben"基--丙醇,L-Phenylalaninol
D-ben"甘氨醇,R-ben"甘氨醇,右旋ben"甘氨醇,-ben"甘氨suan",(R)-(-)--ben"氨基乙醇,D-Phenylglycinol
D-脯氨醇,(R)-(-)--吡咯烷甲醇,D-Prolinol
L-蛋氨醇,L-(-)-蛋氨醇,(S)--氨基-4-(甲硫基)--丁醇,L-Methionionl
L-蘇氨醇,H-蘇氨醇,L-Threoninol
L-纈氨醇,(S)--氨基-3-甲基--丁醇,L-Valinol
L-異亮氨醇,(S,3S)--氨基-3-甲基--戊醇,L-Isoleucinol
D-色氨醇,D-Tryptophanol
BOC-L-天冬酰胺,N-叔丁氧羰基-L-天冬酰胺,Boc-L-asparagine
BOC-D-天冬酰胺,N-叔丁氧羰基-D-天冬酰胺,Boc-D-asparagine
BOC-L-,N-叔丁氧羰基-L-谷胺酰胺,Boc-L-glutamine
BOC-L-谷氨suan",N-叔丁氧羰基-L-谷氨suan",Boc-L-Glutamic acid
BOC-D-谷氨suan",N-叔丁氧羰基-D-谷氨suan",BOC-D-Glutamic acid
BOC-D-ben"甘氨suan",N-叔丁氧羰基-D-ben"甘氨suan",Boc-D-α-phenylglycine
BOC-L-ben"甘氨suan",N-叔丁氧羰基-L-ben"甘氨suan",Boc-L-α-phenylglycine
BOC-L-異亮氨suan",N-叔丁氧羰基-L-異亮氨suan",BOC-L-Ile