二氫缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。
從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。
初學(xué)者易犯錯(cuò)誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時(shí)間延長(zhǎng)。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機(jī)損壞和細(xì)胞丟失。
一次復(fù)蘇細(xì)胞過(guò)多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細(xì)胞交叉污染。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
二氫缺陷型中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。
在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動(dòng),使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺(tái)內(nèi)。
平衡離心:用架盤(pán)天平平衡后,放入離心機(jī)中3000r/min 離心3min
制備細(xì)胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細(xì)胞懸液。
活化與細(xì)胞復(fù)蘇 收到細(xì)胞株包裹時(shí), 請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開(kāi)始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細(xì)胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。
細(xì)胞計(jì)數(shù):細(xì)胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細(xì)胞將復(fù)合細(xì)胞計(jì)數(shù)要求的細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(shí)(或者24-48小時(shí))后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時(shí)間由細(xì)胞情況而定。
公司其他銷(xiāo)量大產(chǎn)品信息:0- 偶氮&膦mN/-(4-&--膦suan"基 偶氮)-7-(3-硝基 偶氮)-,8-二羥基萘-3,6-二磺suan"/CPA-mN 顯色劑 克 77350-04-0 77350-04-0偶氮&膦mN 偶氮&膦mN CPA-mN
03 孔雀綠草suan"鹽/孔雀石綠草suan"鹽/堿性綠4/Malachite green oxalate 高純,67%,&害品 進(jìn)分 437-9-8 437-9-8孔雀綠草suan"鹽 孔雀綠草suan"鹽 Malachite green oxalate
進(jìn)分
50克 進(jìn)分
03- 孔雀綠/孔雀石綠/堿性孔雀石綠/品綠/ 胺綠/鹽基塊綠/嚴(yán)基塊綠/塊綠/中國(guó)綠/Malachite green BS 569-64- 569-64-孔雀綠 孔雀綠 Malachite green
04 固藍(lán)B鹽/堅(jiān)牢藍(lán)B鹽/重氮藍(lán)B鹽/藍(lán)光重氮色鹽藍(lán)/&化四氮鄰二甲氧基 胺/Fast Blue B salt FMP,90% 克 463-94-6 463-94-6固藍(lán)B鹽 固藍(lán)B鹽 Fast Blue B salt
0克
04- 鄰聯(lián)茴香胺/聯(lián)大茴香胺/二甲氧聯(lián) 胺/3,3′-二甲氧基-4,4′-二氨基聯(lián) /3,3-二甲氧基聯(lián) 胺/3,3'-二甲氧基-,'-聯(lián) -4,4'-二胺/鄰二茴香胺/3,3'-Dimethoxybenzidine 超純,98%,&害品 上海 9-90-4 9-90-4鄰聯(lián)茴香胺 鄰聯(lián)茴香胺 3,3'-Dimethoxybenzidine
上海
上海
04- 鄰聯(lián)茴香胺鹽suan"鹽/聯(lián)大茴香胺鹽suan"鹽/3,3’-二甲氧基聯(lián) 胺鹽suan"鹽/聯(lián)大回香胺鹽suan"鹽/快藍(lán)B/二鹽suan"鄰聯(lián)茴香胺/o-Dianisidine dihydrochloride ACS,98%,&害品 上海 035-40-0 035-40-0鄰聯(lián)茴香胺鹽suan"鹽 鄰聯(lián)茴香胺鹽suan"鹽 o-Dianisidine dihydrochloride