CV-(非洲綠猴腎細(xì)胞) 細(xì)胞潛伏期(latent phase):細(xì)胞接種后,先經(jīng)過一個在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)的懸浮期.此時,細(xì)胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形.然后細(xì)胞貼附于載體表面,稱貼壁,懸浮期結(jié)束. 細(xì)胞貼壁速度與細(xì)胞種類,培養(yǎng)基成分,載體的理化性質(zhì)等密切相關(guān)。一般情況下,原代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁速度慢,可達(dá)0-24 小時或更多,而傳代細(xì)胞系貼壁速度快,通常0-30 分鐘即可貼壁。細(xì)胞貼壁后還需經(jīng)過一個潛伏階段,才進(jìn)入生長和增殖期.原代培養(yǎng)細(xì)胞潛伏期,約24-96 小時或更長,連續(xù)細(xì)胞系和腫瘤細(xì)胞潛伏期短,僅需6-24 小時。
細(xì)胞指數(shù)增生期(logarithmic growth phase) 這是細(xì)胞增殖zui旺盛的階段,分裂相細(xì)胞增多。指數(shù)增生期細(xì)胞分裂相數(shù)量可作為判定細(xì)胞生長是否旺盛的一個重要標(biāo)志。通常以細(xì)胞分裂相指數(shù)(Mitotic index,MI)表示,即細(xì)胞群中每000 個細(xì)胞中的分裂相數(shù)。一般細(xì)胞的分裂指數(shù)介于0.%-0.5%,原 代細(xì)胞分裂指數(shù)較低,而連續(xù)細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞分裂相指數(shù)可高達(dá)3%-5%。CV-(非洲綠猴腎細(xì)胞)指數(shù)增生期的細(xì)胞是細(xì)胞活力時期,是進(jìn)行各種實(shí)驗(yàn)*時期,也是凍存細(xì)胞的時機(jī)。在接種細(xì)胞數(shù)量適宜情況下,指數(shù)增生期持續(xù)3-5 天后,隨著細(xì)胞數(shù)量不斷增多、生長空間減少,zui后細(xì)胞相互接觸匯合成片。
正常細(xì)胞相互接觸后能抑制細(xì)胞運(yùn)動,這種現(xiàn)象稱接觸抑制現(xiàn)象(contact inhibition)。而惡性腫瘤細(xì)胞無接觸抑制現(xiàn)象,能繼續(xù)移動和增殖,導(dǎo)致細(xì)胞向三維空間擴(kuò)展,使細(xì)胞發(fā)生堆積(piled up)。細(xì)胞接觸匯合成片后,雖然發(fā)生接觸抑制,但只要營養(yǎng)充分,細(xì)胞仍能進(jìn)行增殖分裂,因此細(xì)胞數(shù)仍然在增多。但是,當(dāng)細(xì)胞密度進(jìn)一步增大,培養(yǎng)液中營養(yǎng)成分減少,代謝產(chǎn)物增多時,細(xì)胞因營養(yǎng)枯竭和代謝產(chǎn)物的影響,導(dǎo)致細(xì)胞分裂停止,這種現(xiàn)象稱密度抑制現(xiàn)象(Density Inhibition)。
培養(yǎng)細(xì)胞注意事項(xiàng):
實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前,無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面,并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘后,才開始實(shí)驗(yàn)操作。每次操作只處理一株細(xì)胞株,且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基,以避免失誤混淆或細(xì)胞間污染。實(shí)驗(yàn)完畢后,將實(shí)驗(yàn)物品帶出工作臺,以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運(yùn)轉(zhuǎn)0分鐘以上后,再進(jìn)行下一個細(xì)胞株之操作。
無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞,必要物品,例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暫時放置,其它實(shí)驗(yàn)用品用完即應(yīng)移出,以利于氣流之流通。實(shí)驗(yàn)用品以70%ethanol擦拭后才帶入無菌操作臺內(nèi)。實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在抬面之無菌區(qū)域,勿在邊緣之非無菌區(qū)域操作。
小心取用無菌之實(shí)驗(yàn)物品,避免造成污染。勿碰觸吸管尖頭部或是容器瓶口,亦不要在打開之容器正上方操作實(shí)驗(yàn)。容器打開后,以手夾住瓶蓋并握住瓶身,傾斜約45°角取用,盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌面。
工作人員應(yīng)注意自身之安全,須穿戴實(shí)驗(yàn)衣及手套后才進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。對于來自人類或是病毒感染之細(xì)胞株應(yīng)特別小心操作,并選擇適當(dāng)?shù)燃壷疅o菌操作臺(至少ClassⅡ)。操作過程中,應(yīng)避免引起aerosol之產(chǎn)生,小心毒性藥品,例如DMSO及TPA等,并避免尖銳針頭之傷害等。
公司其他類型產(chǎn)品信息:SCCRAM肉湯 50 濾膜法食品中沙門氏菌前增菌(SN/T059.)
SCCRAM Broth F9(畸胎瘤細(xì)胞) 03 察氏培養(yǎng)基 GB 250g/瓶 青霉和曲霉的分離鑒別
LLC Lewis(肺癌細(xì)胞) 04 馬鈴薯‐葡萄糖‐瓊脂培養(yǎng)基(不含)250g/瓶 50 霉菌和酵母菌計數(shù)
C27(乳腺腫瘤細(xì)胞) 05 玉米粉瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于真菌培養(yǎng)
MFC(胃癌細(xì)胞) 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 藥典 250g/瓶 用于霉菌、酵母菌計數(shù)
B6(黑色素瘤細(xì)胞) 2 酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD) 250g/瓶 用于霉菌、酵母菌計數(shù)4金黃色葡萄球菌
P85(肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞) 080 7.5%氯化鈉肉湯 250g/瓶 金黃色葡萄球菌的均質(zhì)增菌
S-80(腹水瘤細(xì)胞) 0802 0%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯 250g/瓶 用于金黃色葡萄球菌的增菌
RM-(前列腺癌細(xì)胞) 0803 豆粉瓊脂 250g/瓶 用于配制血瓊脂平板
SAC-IIC3(腹水瘤細(xì)胞) 5070 無菌裂解脫纖維綿羊血 50ml/瓶
NG08-5 [ 08CC5 ](小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞) 0804 Baird‐Parker 瓊脂基礎(chǔ) GB、SN 250g/瓶 金黃色葡萄球菌分離與計數(shù)
SAC-IIB2(腹水瘤細(xì)胞) 2080 亞碲酸鉀卵黃增菌液 5ml×20 支/盒 每支用于95ml0804 中
Hepa -6(肝癌細(xì)胞) 0805 腦心浸出液肉湯(BHI) 250g/瓶 用于細(xì)菌的培養(yǎng)
P388D(淋巴瘤細(xì)胞) 20802 兔血漿 0.5ml×0 支/盒 用于血漿凝固酶試驗(yàn)