小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶 NEELISA試劑盒 酶聯免疫吸附測定試劑盒
使用說明書elisa法測定
規格:48T/96T
本試劑盒僅供體外研究使用!
ELISA法定量測定人尿液或其它相關生物液體小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶 NEELISA試劑盒的含量。
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操作步驟 實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的小鼠中性粒細胞彈性蛋白酶 NEELISA試劑盒. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/font>00μl,余孔分別加標準品或待測樣品00μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應20分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加標記抗體工作液 00μl(取μl標記抗體加99μl標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡-2分鐘,200μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同標記抗體工作液) 00μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡-2分鐘,200μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔顯色不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后5分鐘以內進行檢測。