中文名稱：大鼠骨成型蛋白4（BMP4）ELISA試劑盒
大鼠骨成型蛋白4（BMP4）ELISA試劑盒 實驗原理：
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。
大鼠鈣調素（CAM）ELISA試劑盒 實驗材料與試劑配制：
1.儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2.緩沖液使用：加5ul的緩沖液于50ul的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3.洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
樣品收集、處理及保存
1.細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2.細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104-106/ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3.血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5.體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7.樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8.保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
大鼠鈣調素（CAM）ELISA試劑盒 操作步驟：
1.取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30分鐘。
2.分組：取出 96孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準 品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。
注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3.加樣：依照標準品的順序分別加入 100ul的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 100ul的蒸餾水；其余微孔中加入
100ul的待測樣本。
4.加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 50ul的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5.溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于 37℃恒溫孵育1小時。
6.洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標板 5次，用吸水紙*拍干。
7.顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。
8.終止：25-37℃下避光反應10-15分鐘，加入50ul終止液。
9.讀板：在450nm波長讀取各孔的OD 值。 注：讀板時必須拭干板底殘留的液體和手指痕跡，讀板時間控制在終止反應后的 30分鐘內，以免影響準確性。
注意事項：
1.實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2.加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響實驗的準確性以及重復性。
3.孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4.反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
5.建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6.建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：2-8℃
2.有效期：6個月
我們的優勢：
1、專業的ELISA試劑盒生產企業：專業的，可靠的實驗結果，優秀的產品質量，低廉的市場價格，實惠、經濟、可靠；
2、*抗體----高效、靈敏、特異；
3、*、規范的包被操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高；
4、*的優化方案----重復性高，可靠性強；
5、ELISA試劑盒特點：高靈敏度、高精密度，高重現性，高特異性。不僅有高可靠性的實驗結果，更為您節約實驗成本和時間；
6、購買本公司的ELISA試劑盒，免費代測；
7、技術服務要求：專業，規范，高效；
8、適用于血清、血漿、細胞液、體液以及組織勻漿等多種類型的樣本；
9、可檢測動物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等；
10、可檢測指標齊全：炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質金屬蛋白酶、脂肪因子等等；
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