Scientz-2C基因導入儀(智能型)
產品簡述:
電轉化可以用來將DNA轉入受態細菌、動植物細胞、酵母細胞中。相對化學方法,電轉化法可以獲得更高的轉化效率。這種方法比其它方法獲得的重復性更加好,操作簡易并節省時間,導入效率高,已經成為*的分子生物學基本技術。
該儀器整機一體化設計,操作簡單,顯示直觀,微處理器控制的脈沖放電采用人機對話界面,操作簡單、直觀、細化了電容、電阻的設定范圍,使細胞的電穿孔實驗在相關條件下有了更廣泛的選擇。
應用領域:
1、細胞雜交、融合基因導入
2、導入藥物、蛋白、抗體等分子對細胞的結構和功能進行研究
3、細菌、酵母及其他微生物的電轉化
4、哺乳動物細胞的轉染、植物組織和原生質體質體的轉染
5、導入標記基因起到標記、指示的作用
Scientz-2C基因導入儀(智能型)
工作原理
細胞電轉染(電轉),也叫細胞電穿孔 (electroporation),是把外源大分子物質DNA、RNA、siRNA、蛋白質等以及一些小分子導入細胞膜內部的重要方法。
在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質內分到的電壓可以忽略不計,細胞質內部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內的電轉過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質到細胞核等處。
由于電轉技術依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉影響比較小。相比化學轉染方法和病毒載體轉染方法,電轉可以用在所有的細胞種類上,而且容易定量控制。
細胞電轉電場圖 1 細胞膜近似絕緣體,細胞附近電轉液中電流扭曲。 2 在串聯電路中電阻越大分到電壓越大,細胞兩端電壓基本都落在兩端細胞膜上。 3 只有一個細胞端面電轉有效。 4 細胞質內分到電壓很小,DNA電轉進入細胞膜后馬上停止,后續靠細胞本身機制慢速擴散。 5 細胞核兩端電壓及其微小,微小的電壓又落在核膜上,核內部*沒有電壓,電轉沒有基因毒性。 |
產品特點
1、轉化率高 轉化時間短、重復性優異
2、控制精確 采用微處理器控制的脈沖放電
3、智能儲存 可存儲實驗日志,并且自定義程序無*存儲
4、外形美觀 整機一體化設計,顯示直觀,操作簡單
應用領域
1、細菌、酵母及其它微生物的電轉化
2、哺乳動物細胞的轉染
3、植物組織和原生質體的轉染
4、細胞雜交、融合、基因導入
5、導入標記基因,起到標記、指示的作用
6、導入具體的功能基因進行研究
7、導入藥物、蛋白、抗體等其它分子對細胞的結構和功能進行研究
技術參數:
型號 | Scientz-2C |
脈沖形式 | 指數衰減 |
高壓輸出電壓 | 400-2500V |
低壓輸出電壓 | 50-450V |
高壓電容 | 1、5、6、25、30、31UF |
低壓電容 | 100UF、125UF、150UF...1675UF,以25步進 |
并接電阻 | 50、100、150、1600 ... ∞共30檔 |
操作系統 | 微電腦控制 |
時間常數 | 帶RC時間常數,可調節 |
主機外形尺寸 | 36.8*31.6*22.9cm |
主機凈重 | 10.5kg |
包裝尺寸 | 480*420*280mm |
實驗介紹
1、LI J等人基于高通量篩選分析p53–MDM2蛋白相互作用的小分子抑制劑的研究結果。
2、ZHANG S Y等人發現和鑒定一個*的G蛋白偶聯受體119激動劑的研究結果。
1、LI J, ZHANG S, GAO L, et al. A cell-based high-throughput assay for the screening of small-molecule inhibitors of p53-MDM2 interaction [J]. Journal of biomolecular screening, 2011.
2、ZHANG S Y, LI J, XIE X. Discovery and characterization of novel small molecule agonists of G protein-coupled receptor 119 [J]. Acta pharmacologica Sinica, 2014.
不同菌種的轉化率
品種 | 品種 | 電容 | 電阻 | 導入盒 | 轉化率 | 反饋用戶名 |
酵母 | 1200-1500V | 25µF | 200-400Ω | 2mm | 2.2-3.2*10²cfu/ug DNA | 上海肺科 |
大腸桿菌 | 1250V | 5µF | 400-1000Ω | 1mm | 10 -10 cfu/ug DNA | 清華大學 |
大腸桿菌 | 1100V | 5µF | 500Ω | 1mm | 2500cfu/ug DNA | 清華大學 |
大腸桿菌 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 2500cfu/ug DNA左右 | 解方軍總 |
羊細胞 | 250V | 500µF | 500Ω | 4mm | 10²cfu/ug DNA | 中科院發育所 |
畢赤酵母 | 1500V | 25µF | 400Ω | 2mm | 1.8x10³cfu/ug DNA | 華東師范大學 |
枯草芽孢桿菌 | 1250V | 25µF | 400Ω | 2mm | 10²cfu/ug DNA | 華東師范大學 |
備注:因各單位實驗條件不盡相同,以上實驗參數僅供參考