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ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。
影響ELISA試驗效果常見問題原因分析及解決辦法
選擇試劑時，應選擇質量優良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
加樣可能碰到的問題:
1、過長（特別是室內溫度較高時）；
2、手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間；
3、加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。.血清或血漿標本分離不好即進行加樣。
相應解決辦法：
1、標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2、加樣后及時放入孵箱。
3、加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4、如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5、標本較多時，請分批操作。
人異常凝血酶原試劑盒孵育可能碰到的問題:
1、孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發，吸附于孔壁，難于清洗*；
2、孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。
相應解決辦法：
1、貼封片或加蓋；
2、按說明步驟嚴格控制操作時間。
洗板可能碰到的問題:
1、采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉;
2、采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差;
3、反應板過多造成洗板等待時間長。
相應解決辦法：
1、保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2、合理安排，或多用幾臺洗板機。
