5/6-FAM SE (NHS-Fluorescein, FITC-NHS)

5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯

產品信息

產品描述

NHS-Fluorescein（NHS-熒光素，FITC-NHS），別名：5/6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（5/6-carboxyfluorescein succinimidyl ester,5/6-FAM SE），是一種熒光素染料的胺反應性衍生物，具有廣泛的分析應用，可作為抗體和其他探針的標記，用于熒光顯微鏡檢測、流式細胞分析和免疫熒光測定（如Western印跡和ELISA）。

NHS-Fluorescein（NHS-熒光素，FITC-NHS，5/6-FAM SE）通過琥珀酰亞胺酯（NHS酯）官能團活化。與FITC（異硫氰酸熒光素）相比，在生物偶聯上表現出更多優勢。首先，FAM形成的酰胺能更好耐受水解，其次，FAM對偶聯條件的要求更不嚴格且有更好的偶聯效率，生成的偶聯物穩定性更突出。FITC標記的核酸和多肽與對應的FAM標記產物比較，具有更快變質的傾向。據發現，在絕大數的生物應用中都能用FAM試劑來替代FITC試劑。

產品特性

1） CAS NO.：117548-22-8

2） 同義名：5(6)-FAM, SE;5(6)-FAM,NHS ester;5(6)-Carboxyfluorescein NHS ester (mixture of isomers), 5(6)-Carboxyfluorescein N-hydroxysuccinimide ester;5-(and-6)-Carboxyfluorescein, succinimidyl ester;FLUOS; 5 (6)-羧基熒光素N -羥基琥珀酰亞胺酯；NHS-熒光素（5/6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯）,混合異構體；5/6-羧基熒光素琥珀酰亞胺酯；

3） 分子式：C25H15NO9

4） 分子量：473.39

5） 熒光：λex 492 nm; λem 517 nm in DMF

6） 外觀：粉末

7） 溶解性：溶于DMSO、DMF

8） 純度：≥95%

9） 化學結構式：

保存與運輸方法

保存：-20℃避光干燥保存，2年有效。 

運輸：冰袋運輸。

注意事項

1） 5/6-FAM SE是5-FAM和6-FAM的異構體混合物，這些異構體的特性在激發和發射光譜方面無法區分。對于蛋白應用，不需要分離特定異構體。

2） 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

SE化合物生物標記的幾個考慮因素

1） 溶劑

大多數情況下，SE化合物（反應性染料）都是疏水性分子，需用無水DMF或DMSO作為溶劑。

比如：5/6-FAM SE（Mw：473.39）需先溶于高質量無水DMSO配制成≥1mg/ml的母液，之后加入反應緩沖液中進行標記實驗。強烈推薦新鮮配制母液和工作液，如果非要保存母液的話，請務必根據單次用量分裝，≤-20℃避光密封干燥保存，盡量在1個月內用完。

2） 反應pH

SE與胺的標記反應具非常強的pH依賴性。胺反應化合物與非質子化的脂肪胺反應，包括：蛋白的末端胺，賴氨酸的ε-氨基。氨酰化通常在pH 7.5以上進行。通過SE基團的蛋白修飾通常在pH 7.5-8.5之間進行，而異硫氰酸基團需在pH 9.0-10.0之間才能獲得最佳的標記效果。

3） 反應緩沖液

緩沖液含游離胺（比如：Tris、甘氨suan和巰基化合物）必須避免，因為這些也是胺反應試劑。銨鹽（硫酸銨或醋酸銨）普遍用于蛋白沉淀中，必須在進行染料標記之前去除。

比如：5/6-FAM SE進行蛋白標記，可選擇50mM硼酸鈉緩沖液（pH 8.5）作為反應緩沖液。

4） 反應溫度

大部分標記反應在室溫進行，然而，對于某些特殊的標記反應可能需提高或降低溫度。

相關產品

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發生產等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供優質產品。