商品屬性
鑒定 | STR鑒定正確 | 種屬 | 小鼠 |
生長特性 | 懸浮 | 細(xì)胞形態(tài) | 見說明 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 分類 | 小鼠細(xì)胞系 |
商品介紹
生長特性 懸浮細(xì)胞
生物安全等級 1
生長培養(yǎng)基 DMEM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長密度達(dá)到90%時，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細(xì)胞凍存
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠3-羥基-3-甲基戊二酰合酶(HMGCS)檢測試劑盒 ，英文名： HMGCS ELISA Kit
Mouse somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)檢測試劑盒
MouseColonCancerAigen,CCAELISAKit 小鼠結(jié)腸癌抗原(CCA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體
通用型豬沙門氏菌(SwineSalmonella)試劑盒20次
ELISAKitvisfatin大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素
IL34重組小鼠 IL-34 蛋白 Protein
Ceruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原 0.5mgCeruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原
ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form) Protein
CROT Protein Human 重組人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 標(biāo)簽)
FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白
Ceruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原 0.5mgCeruloplasmin peptide 銅藍(lán)蛋白抗原
CROT Protein Human 重組人 CROT 蛋白 (474 Leu/Val, His 標(biāo)簽)
IL34重組小鼠 IL-34 蛋白 Protein
FGFR4 Protein Mouse 重組小鼠 FGFR4 / CD334 蛋白
ISG15重組人 ISG15 / G1P2 蛋白 (mature form) Protein
PC-61 (小鼠雜交瘤細(xì)胞CD25)小鼠羥脯酸(Hyp)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human talin (Gelson) ELISA Kit 人凝膠原蛋白(gelson)檢測試劑盒
Humanlowdensitylipoprotein,LDLELISAKit 人低密度脂蛋白(LDL)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
GuineaPigplasmin-aiplasmincomplex,PAP檢測試劑盒豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒20次
MouseBonemorphogeneticproteieceptorⅡ,BMPR-ⅡELISAKit小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
小鼠硫氧還蛋白還原酶(xR)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠硫氧化還原蛋白(x)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠流行性出血熱抗體（EHF-Ab）檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)檢測試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞接收后的處理：
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細(xì)胞需要離心回收。
