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種屬 | 雞 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
生長特性 | 懸浮 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 | 編號(hào) | GOY-01X0543 |
商品詳情：
別稱 DT-40; DT 40; DT40B; LSCC-DT40
年齡（性別） 1日齡
組織來源 法氏囊，淋巴瘤
生長特性 懸浮細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 淋巴母細(xì)胞樣
背景描述：DT40細(xì)胞是Hyline SC雞法氏囊淋巴細(xì)胞株經(jīng)鳥類白血病病毒誘導(dǎo)建株的細(xì)胞系。原始淋巴瘤用羅氏相關(guān)病毒1(RAV-1)感染出生1天的小雞得到，法氏囊中生成的腫瘤制成細(xì)胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經(jīng)過一次體內(nèi)移植后，建立了DT40細(xì)胞。DT40細(xì)胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，表達(dá)的c-myc RNA水平較高。DT40細(xì)胞缺少一個(gè)正常c-myc基因，但含有兩個(gè)拷貝ALV去調(diào)控的myc基因。DT40細(xì)胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在IgL位點(diǎn)，DT40???
生物安全等級(jí) 1
生長培養(yǎng)基 DMEM＋0.05mM β-mercaptoethanol＋10% Tryptose Phosphate Broth＋5% Chicken Serum＋10% FBS＋1% P/S
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
倍增時(shí)間 ~48 hours
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠白介素23(IL-23)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IL-23 ELISA Kit
Mouse activated leukocyte cell adhesion molecule (ALCAM) ELISA Kit 小鼠白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)檢測(cè)試劑盒
ELISA 小鼠白介素-1a(mouse IL-1a) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforIL-8/CXCL8(HumanIerleukin8)ELISAKIT人白介素8
通用型胡蘿卜細(xì)菌性葉斑病(Xahomonascampesispv.Carotae;Xccar)試劑盒20次
ELISAKitALDH大鼠乙脫氫酶
CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 Protein
胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)重組蛋白 Recombinant Caspase Activated DNase (CAD)
COL5A2重組人 COL5A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
IDO1 Protein Human 重組人 IDO1 / IDO 蛋白
IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重組野豬 IL10 / Interleukin-10 蛋白
胱天蛋白酶激活脫氧核糖核酸酶(CAD)重組蛋白 Recombinant Caspase Activated DNase (CAD)
IDO1 Protein Human 重組人 IDO1 / IDO 蛋白
CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 Protein
IL10 Protein Sus scrofa (Pig) 重組野豬 IL10 / Interleukin-10 蛋白
COL5A2重組人 COL5A2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
DT40 (雞淋巴瘤細(xì)胞)小鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human CpG oligodeoxynucleotide (CpG-ODN) ELISA Kit 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)檢測(cè)試劑盒
HumaeninELISAKit 人腎素(Renin)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanComplemefragme3brccptor,C3bR檢測(cè)試劑盒人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織CaMKIV激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
humanproviraliegrationsite1,Pim1ELISAKit人前病毒整合位點(diǎn)1(Pim1)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蘇云金芽孢桿菌蛋白(BT)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
雙花扁豆凝集素(DBA)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
蛇毒因子(CVF)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng) ：
一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
五、 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
七、該細(xì)胞僅供科研使用。
八、備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。
九、 注意： 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。
