原代細胞培養條件:
?溫度?:通常在37℃下進行,以模擬體內溫度。
?pH值?:培養液的pH值應保持在7.2~7.4之間,以維持細胞的正常生理狀態。
?氣體環境?:在含有5% CO2的培養箱中進行,以促進細胞生長。
?培養基?:使用含有適當營養成分的培養基,如Eagle's MEM、DMEM等。
?無菌操作?:整個培養過程需要在無菌條件下進行,以防止污染。
本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷!
產品名稱 | 組織來源 | 骨髓 | |
產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 產品貨號 | CS-X2711 |
細胞簡介:
豬骨髓間充質干(BMSC)分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質系統內存在的骨髓間充質干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細胞總數的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質干細胞的體外培養條件要求較高,在培養過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。
方法簡介:
公司實驗室分離的豬骨髓間充質干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質量檢測:
公司實驗室分離的豬骨髓間充質干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養信息:
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞培養的具體操作步驟如下:
?組織處理?:將動物組織從機體中取出,剪碎后用等消化酶處理,使其分散成單個細胞。
?細胞計數?:使用血細胞計數器或其他方法對細胞進行計數,確保細胞密度適中。
?接種培養?:將細胞懸液接種到培養瓶中,加入適量的培養基,置于37℃、5% CO2的培養箱中培養。
?換液和傳代?:定期更換培養液,當細胞達到一定密度時進行傳代培養,以維持細胞的生長狀態。
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VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標簽) Protein
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原代細胞的4種培養方法:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響,以及局部環境的生物調節作用