原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

人椎間盤髓核細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

人椎間盤髓核細(xì)胞分離椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時(shí)體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時(shí)位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)”，這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human dermatan sulfate (DS) ELISA Kit 人皮膚素(DS)ELISA試劑盒

HumanCpGoligodeoxynucleotide,CpG-ODNELISAKit 人未甲基化寡聚脫氧核苷酸(CpG-ODN)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chickehyroxine,T4ELISA試劑盒雞甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞PP2A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit小鼠凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠鐵蛋白elisa試劑盒   小鼠鐵蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠鐵蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠鐵蛋白試劑盒、小鼠鐵蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa試劑盒   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠糖原0酸化酶同工酶試劑盒、小鼠糖原0酸化酶同工酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠糖化血紅蛋白elisa試劑盒   小鼠糖化血紅蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠糖化血紅蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠糖化血紅蛋白試劑盒、小鼠糖化血紅蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體elisa試劑盒   小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體試劑盒、小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠組蛋白H3(H3)ELISA試劑盒 ，英文名： H3 ELISA Kit

Nude mice of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA試劑盒

Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit 小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2規(guī)格：48T/96T

土壤氮含量克爾道(Kjeldahl)法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitACA-IgA大鼠抗心0脂抗體IgA規(guī)格：48T/96T

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MTR-1A (Melatonin receptor-1A 0.5mgMTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受體(抗原)

PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

CFL1 Protein Human 重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ENTPD5 Protein Mouse 重組小鼠 ENTPD5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人椎間盤髓核細(xì)胞MTR-1A (Melatonin receptor-1A 0.5mgMTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受體(抗原)

CFL1 Protein Human 重組人 CFL1 / N-cofilin 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ENTPD5 Protein Mouse 重組小鼠 ENTPD5 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PDE4B重組人 PDE4B / DPDE4 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次，如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩Ｏ瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí)，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時(shí)需要換新塞。