核糖核酸酶T1/Rnase T1
分子量:11.2kDa,單體
來源:大腸桿菌細胞含有米曲霉(Aspergillus oryzae)來源的克隆基因rntA
活力:1000U/ul
活力定義:1個活性單位是指37℃,pH7.5條件下,酵母RNA溶解水解15分鐘使其260nm波長吸光值增加1.0所需的酶量
酶活性分析混合物:50mM Tris-HCL(PH7.5), 2mM EDTA, 3mg/ml酵母RNA
保存緩沖液組分:50mM Tris-HCL(PH7.4)和50%(v/v)甘油
質量控制:相關測試表明無內切和外切脫氧核糖核酸酶、蛋白酶污染,功能檢測方法為質粒DNA純化過程中的RNA降解(與RNase A協同作用)
抑制劑:金屬離子Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+(MgCL2, 100mM濃度時抑制效率約40%;CaCL2,10mM濃度時抑制效率約30%;Zn2+、Fe2+和Cu2+在1mM時抑制效果很強)、單核苷酸(2-GMP,3-GMP等)、guanilyl-2-5-鳥苷
失活:熱失活是可逆的,建議采用過柱純化或苯酚/氯仿抽提除去該酶
性狀:核糖核酸酶 T1是一種內切酶,在G殘基位點特異性降解單鏈RNA。該酶通過形成核苷2′,3′-環磷酸中間體來切割3′-鳥苷殘基與鄰近核苷5′-OH基團之間的磷酸二酯鍵。反應產物是3′-GMP末端寡核苷酸。RNase T1發揮活性無需金屬離子參與
用途:生化研究。除去DNA抽取物中的RNA;RNA測序;核糖核酸酶保護分析,與RNase A協同作用;除去重組蛋白抽提物中的RNA;檢測G-less cassette DNA模板體外轉錄合成的RNA轉錄子水平
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