土壤硝態氮試劑盒-國標法
土壤硝態氮試劑盒-國標法
本試劑盒僅供科研使用 1 土壤硝態氮試劑盒說明書 (貨號：WS9130F 紫外法 48 樣) 一、產品簡介： 硝態氮是指硝酸鹽中所含有的氮元素，土壤中的有機物分解生成銨鹽，被氧化后變為 硝態氮。土壤中硝態氮是高等植物吸收氮的主要形式之一，其含量直接關系到作物的產 量與品質。 土壤浸出液中硝酸根離子在 220nm 有明顯光吸收而在 275nm 波長處沒有吸收峰，通 過測定土壤浸出液在 275nm 處的吸光度，乘以一個校正因素 f 以消除有機質在 220nm 波 長處的光吸收干擾。進而得到土壤中硝態氮的含量。 二、試劑盒的組成和配制： 試劑名稱 規格 試劑名稱保存要求 備注 試劑一 粉劑 g×1 瓶 4℃保存 臨用前先加 50mL 的蒸餾水，全部轉移 到量筒（自備）中，再加蒸餾水定容至 300mL，混勻，備用。 標準品 液體×1 支 4℃保存 若重新做標曲，則用到該試劑。 三、所需的儀器和用品： 紫外分光光度計、石英比色皿（光徑 1cm）、蒸餾水、天平、常溫離心機、量筒、振蕩 培養箱。 四、土壤硝態氮的測定： 建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗 樣本和試劑浪費！ 1、樣本處理 取約 1g 新鮮土樣，過 40 目篩網備用。 【注】：1、土壤經風干或烘干易引起 NO3－ -N 變化，故一般都用新鮮土樣測定。 2、硝酸根為陰離子，不為土壤膠體吸附，且易溶于水，很易在土壤內部移動，在土壤剖面上 下層移動頻繁，因此測定硝態氮時注意采樣深度。 2、上機檢測： ① 紫外分光光度計預熱 30min 以上。 ② 在 5mLEP 管中加入： 測定管 空白管（僅做一次） 鮮土（g） 1 試劑一（mL） 5 5 25℃，220rpm/min 往復式振蕩培養 1h， 混勻（成渾濁液狀態）用慢速定性濾紙過濾，澄清的濾液待測。 取 1mL 至 1mL 石英比色皿中，220nm 分別讀吸光值 A1、A2， 再于 275nm 分別讀吸光值 A3、A4； A 測定管=A1-(A3×f)，A 空白管=A2-(A4×f) △A=A 測定管-A 空白管 注：f 為矯正因素 2.23。 【注】若測定管于 220nm 的 A 值大于 1，需用試劑一稀釋濾液使 A220nm 的值在 1 以內， 稀釋倍數 D 需代入公式計算。本試劑盒僅供科研使用 五、結果計算： 1、標準曲線方程：y = 0.2627x-0.0023；x 為標準品濃度（μg/mL），y 為△A。 2、土壤硝態氮(NO3 --N)含量(mg/kg 鮮土)=[(△A+0.0023)÷0.2627×V]÷W×D =19.04×(△A+0.0023)÷W×D V---反應總體積，5mL； D---稀釋倍數，未稀釋即為 1； W---實際稱取鮮土質量，g 【注】：*低檢出限為 0.5μg /g。 附：標準曲線制作過程： 1 標準品母液（100μg/mL）； 2 用試劑一把母液稀釋成六個濃度梯度的標準品：0, 0.5, 1, 2, 3, 4. μg/mL。也可根據實 際樣本來調整標準品濃度。 3 直接取不同濃度的標準品 1mL 至 1mL 玻璃比色皿中，分別于 220nm 和 275nm 讀吸 光值 A1、A2，A 標準品=A1-(A2×f)。根據結果即可制作標準曲線。 2
