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鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase)測定試劑盒

參考價	￥880.00

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￥880.00

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公司名稱上海宇淳生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時間2024/5/21 14:11:57
訪問次數(shù)313

產(chǎn)品標簽:

鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase)試劑盒

規(guī)格

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上海宇淳生物科技有限公司是一家致力于生物技術(shù)服務(wù)、實驗試劑和耗材銷售，有專業(yè)的科研實驗技術(shù)服務(wù)人員。承接免疫學、分子學、細胞學、病理學、動物造模等技術(shù)實驗，可為高校醫(yī)院及科研單位提供包括病理學、免疫學、細胞生物學、生物化學、動物實驗等技術(shù)服務(wù)，并建立了包含實驗設(shè)計項目實施結(jié)果整理數(shù)據(jù)分析及策略咨詢等一站式的科研服務(wù)。本公司還代理許多先進水平的產(chǎn)品，包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、診斷等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得*好評。特別是生物試劑和細胞產(chǎn)品更是種類齊全、價格實惠。主營產(chǎn)品/服務(wù):試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學試劑盒、細胞凋亡試劑盒。細胞：美國*原代細胞，細胞系，細胞株，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，耗材：細胞培養(yǎng)耗材、普通實驗耗材。生化試劑：*生化試劑、進口分裝生化試劑、國產(chǎn)生化試劑。抗體：進口原裝抗體、進口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等。公司的理念是：為您提供*的產(chǎn)品及服務(wù)，產(chǎn)品價格較好的競爭力。

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sigma試劑，核酸染料試劑，熒光定量PCR試劑，活體成像試劑，熒光探針試劑，細胞增殖與毒性檢測試劑盒，超敏ECL發(fā)光液，細胞染色試劑，吸頭

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鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase)測定試劑盒
α-L-鼠李糖苷酶（α-L-rhamnosidase，EC 3.2.1.40）是一種水解酶，可以水解人們?nèi)粘ｏ嬍持谐Ｒ姷狞S酮苷類化合物。該酶廣泛分布于自然界的細菌和真菌等生物中。它在工業(yè)上具有許多潛在的應(yīng)用價值。

鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase)測定試劑盒產(chǎn)品信息

鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase)測定試劑盒

本試劑盒僅供科研使用

α-L-鼠李糖苷酶(α-L-rhamnosidase)活性測定試劑盒說明書

（貨號:WS0850F 分光法 24 樣）一、產(chǎn)品簡介： α-L-鼠李糖苷酶（α-L-rhamnosidase，EC 3.2.1.40）是一種水解酶，可以水解人們?nèi)粘?飲食中常見的黃酮苷類化合物。該酶廣泛分布于自然界的細菌和真菌等生物中。它在工業(yè) 上具有許多潛在的應(yīng)用價值。本試劑盒采用對硝基酚-α-鼠李糖苷(PNPR)作為底物，生成黃色的對硝基苯fen（PNP），該產(chǎn)物在 405nm 處有吸收峰。通過檢測 PNP 在 405nm 下的增加速率，即可得到α-L- 鼠李糖苷酶活性的大小。二、試劑盒的組成和配制：試劑名稱規(guī)格保存要求備注提取液液體 30mL×1 瓶 4℃保存試劑一粉劑 mg×1 支 -20℃保存臨用前甩幾下或離心使試劑落入底部，再加 2.2mL 蒸餾水溶解混勻，若難溶解可超聲溶解。試劑二液體 20mL×1 瓶 4℃保存試劑三液體 20mL×1 瓶 4℃保存標準品粉劑 mg×1 支 4℃保存若重新做標曲，則用到該試劑三、所需的儀器和用品：可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、恒溫培養(yǎng)箱、研缽、蒸餾水。四、α-L-鼠李糖苷酶活性測定：建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗樣本和試劑浪費！ 1、樣本制備： ① 組織樣本：取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液，進行冰浴勻漿，4℃×12000rpm 離心 15min，取上清液待測。【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例提取。 ② 細菌/細胞樣本：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數(shù)量（104）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：可直接測定，或者適當稀釋后測定。若渾濁，離心后取上清檢測。 2、上機檢測： ① 可見分光光度計預熱 30 min，調(diào)節(jié)波長為 405nm，蒸餾水調(diào)零。 ② 所有試劑于 40℃水浴中預熱 20 min。 ③ 在 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中依次加入下列試劑：試劑名稱（μL）測定管對照管樣本 40 40 試劑一 80 試劑二 280 360本試劑盒僅供科研使用 2 迅速混勻，40℃保溫 20min 試劑三 400 400 混勻，液體全部轉(zhuǎn)移至 1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）中，立即于 405nm 下讀取吸光值 A，ΔA=A 測定-A 對照（每個測定管需設(shè)一個對照管）。【注】：①若△A 的值非常低在零附近，可增加樣本量 V1（如增至 80μL，則試劑二相應(yīng)減少）或延長反應(yīng)時間 T（如增至 30min 或更長），則重新調(diào)整的 V1 和 T 須代入公式重新計算。 ②若△A 的值超過 1，則需要稀釋樣本，稀釋倍數(shù) D 代入計算公式；五、結(jié)果計算： 1、標準曲線：y = 21.604x - 0.0022，x 是標準品（PNP）摩爾質(zhì)量：μmol；y 是△A。 2、按照樣本質(zhì)量計算：酶活定義：在 40℃下，每克組織每小時水解 1μmoLPNPR 產(chǎn)生 PNP 定義為 1 個酶活單位。 α-L-鼠李糖苷酶(μmol/h/g 鮮重)=[(△A+0.0022)÷21.604]÷(W×V1÷V)÷T×D =3.47×(△A +0.0022)÷W×D 3、按照樣本蛋白濃度計算：酶活定義：在 40℃下，每毫克蛋白每小時水解 1μmoLPNPP 產(chǎn)生 PNP 定義為 1 個酶活單位。 α-L-鼠李糖苷酶(μmol/h/mg prot)=[(△A+0.0022)÷21.604]÷(Cpr×V1)÷T×D =3.47×(△A +0.0022)÷Cpr×D 4、按細胞數(shù)量計算：酶活定義：在 40℃下，每 104個細胞每小時水解 1μmoLPNPP 產(chǎn)生 PNP 定義為 1 酶活單位。 α-L-鼠李糖苷酶(μmol/h/104 cell)=[(△A+0.0022)÷21.604]÷(500×V1)÷T×D =0.007×(△A +0.0022)×D 5、按液體體積計算：酶活定義：在 40℃下，每毫升液體每小時水解 1μmoLPNPP 產(chǎn)生 PNP 定義為 1 個酶活單位。 α-L-鼠李糖苷酶(μmol/h/mL)= [(△A+0.0022)÷21.604]÷V1÷T×D =3.47×(△A +0.0022) W---樣品質(zhì)量，g； V---提取液體積，1 mL； V1---上清液體積（mL），0.04mL； T---反應(yīng)時間，20 min=1/3h； D---稀釋倍數(shù)，未稀釋即為 1； Cpr---上清液蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；建議使用本公司的 BCA 蛋白質(zhì)含量測定試劑盒。附：標準曲線制作過程： 1 制備標準品母液（10μmol /ml）：向標準品 EP 管里面加入 1mL 蒸餾水溶解，若有結(jié)晶析出，需 37℃ 水浴至wan全溶解。 2 把母液稀釋成以下濃度梯度的標準品：0, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1μmol/ml。也可根據(jù)實際樣本來調(diào)整標準品濃度。 3 依據(jù) 40ul 的標準品+360ul 的試劑二，再加 400ul 的試劑三，于 405nm 處讀值；根據(jù)結(jié)果即可制作標準曲線。